RT Easyᵀᴹ II Master Premix សម្រាប់ការសំយោគ cDNA ខ្សែទីមួយសម្រាប់ PCR ពេលវេលាពិត
ការពិពណ៌នាកញ្ចប់៖
- ប្រព័ន្ធប្រតិចារឹកបញ្ច្រាសប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព វាចំណាយពេលត្រឹមតែ 20 នាទីប៉ុណ្ណោះដើម្បីបញ្ចប់ការសំយោគនៃ cDNA ខ្សែទីមួយ។
- ប្រព័ន្ធប្រតិចារឹកបញ្ច្រាសដែលមានភាពប្រែប្រួលខ្ពស់ គំរូកម្រិត pg ក៏អាចទទួលបាន cDNA ដែលមានគុណភាពខ្ពស់ផងដែរ។
- ប្រព័ន្ធប្រតិចារិកបញ្ច្រាសមានស្ថេរភាពកម្ដៅខ្ពស់ សីតុណ្ហភាពប្រតិកម្មនៃប្រព័ន្ធអាចឡើងដល់ 50 ℃ ហើយវាមានដំណើរការប្រតិចារិកបញ្ច្រាសល្អ។
- សូម្បីតែសំណាក RNA ដែលមិនបរិសុទ្ធ (ជាតិអាល់កុលរហូតដល់ 60%, អំបិល Guanidine រហូតដល់ 750mM) ក៏អាចទទួលរងនូវប្រតិកម្មចម្លងបញ្ច្រាស។
- 2 × RT OR-EasyTM លាយបានបន្ថែមថ្នាំ primer បញ្ច្រាសដែលបានធ្វើឱ្យប្រសើរ (Random Primer, Oligo(dT))18 ថ្នាំ primer) ។
ការពិពណ៌នាអំពីកញ្ចប់
2 × RT OR-Easy របស់ ForegeneTMល្បាយអាចសំយោគ cDNA ខ្សែទីមួយនៅសីតុណ្ហភាពខ្ពស់រហូតដល់ 50°C ដែលអំណោយផលដល់ប្រតិកម្មចម្លងបញ្ច្រាសនៃគំរូ RNA រចនាសម្ព័ន្ធបន្ទាប់បន្សំស្មុគស្មាញ។
RNA បន្សុតនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ ជាញឹកញាប់មានផ្ទុកនូវសំណល់អំបិល ហ្គានីឌីន ដែលមានលក្ខណៈសម្បត្តិរារាំងខ្លាំងលើការចម្លងបញ្ច្រាសភាគច្រើន ដែលបណ្តាលឱ្យមានផលប៉ះពាល់នៃការចម្លងបញ្ច្រាសមិនពេញចិត្ត ឬប្រសិទ្ធភាពនៃការចម្លងបញ្ច្រាសទាប។Foregene 2 × RT Mix បង្ហាញពីការអត់ធ្មត់ខ្ពស់ចំពោះជាតិអាល់កុល និងអំបិល Guanidine ។ការអត់ធ្មត់ខ្ពស់បំផុតចំពោះជាតិអាល់កុលនៅក្នុងគំរូ RNA គឺ 60% ហើយការអត់ធ្មត់ខ្ពស់បំផុតចំពោះអំបិល Guanidine គឺ 750mM ។សូម្បីតែ RNA ដែលមិនបរិសុទ្ធក៏អាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ប្រតិកម្មចម្លងបញ្ច្រាសជាមួយ Foregene 2 × RT OR-EasyTMលាយ។
2 × RT OR-EasyTMល្បាយគឺជាសារធាតុចម្លងបញ្ច្រាសយ៉ាងឆាប់រហ័សដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងជាពិសេសសម្រាប់ PCR ពេលវេលាពិត។ប្រព័ន្ធនេះមានប្រសិទ្ធភាពការចម្លងបញ្ច្រាសខ្ពស់ ហើយមិនត្រូវការបន្ថែម primers ទេ ហើយអាចអនុវត្តប្រតិកម្មបញ្ច្រាសបានល្អលើចំនួនតូចនៃគំរូ RNA ។ប្រព័ន្ធប្រតិកម្មពិសេសធ្វើឱ្យប្រតិកម្ម RT កាន់តែងាយស្រួល លឿន និងមានប្រសិទ្ធភាពជាងមុន។ការសំយោគ cDNA ខ្សែទីមួយអាចបញ្ចប់ក្នុងរយៈពេល 20 នាទី។ផលិតផលនេះអាចត្រូវបានប្រើដោយភ្ជាប់ជាមួយផលិតផលបរិមាណហ្វ្លុយវ៉េសរបស់ Foregene ពេលវេលាពិត PCR ងាយស្រួលTMដើម្បីទទួលបានលទ្ធផលពិសោធន៍គុណភាពខ្ពស់។
លក្ខណៈបច្ចេកទេស
| RT ងាយស្រួលTMII Master Premix សម្រាប់ការសំយោគ cDNA ខ្សែទីមួយសម្រាប់ PCR ពេលវេលាពិត | |||
| សមាសធាតុនៃកញ្ចប់ | RT-01021 | RT-01022 | RT-01023 |
| 50 T (ប្រព័ន្ធ 10μl) | 200 T (ប្រព័ន្ធ 10μl) | 800 T (ប្រព័ន្ធ 10μl) | |
| 2 × RT OR-EasyTMលាយ | 0.25 មីលីលីត្រ | 1ml | 1ml × 4 |
| RNase-Free ddH2O | 1.7ml | 1.7ml | 1.7ml × 3 |
| សៀវភៅណែនាំ | 1 ដុំ | 1 ដុំ | 1 ដុំ |
លក្ខណៈពិសេស & គុណសម្បត្តិ
- ប្រព័ន្ធប្រតិចារឹកបញ្ច្រាសប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព វាចំណាយពេលត្រឹមតែ 20 នាទីប៉ុណ្ណោះដើម្បីបញ្ចប់ការសំយោគនៃ cDNA ខ្សែទីមួយ។
- ប្រព័ន្ធប្រតិចារឹកបញ្ច្រាសដែលមានភាពប្រែប្រួលខ្ពស់ គំរូកម្រិត pg ក៏អាចទទួលបាន cDNA ដែលមានគុណភាពខ្ពស់ផងដែរ។
- ប្រព័ន្ធប្រតិចារិកបញ្ច្រាសមានស្ថេរភាពកម្ដៅខ្ពស់ សីតុណ្ហភាពប្រតិកម្មនៃប្រព័ន្ធអាចឡើងដល់ 50 ℃ ហើយវាមានដំណើរការប្រតិចារិកបញ្ច្រាសល្អ។
- សូម្បីតែសំណាក RNA ដែលមិនបរិសុទ្ធ (ជាតិអាល់កុលរហូតដល់ 60%, អំបិល Guanidine រហូតដល់ 750mM) ក៏អាចទទួលរងនូវប្រតិកម្មចម្លងបញ្ច្រាស។
- 2 × RT OR-EasyTMលាយបានបន្ថែមថ្នាំ primer បញ្ច្រាសដែលបានធ្វើឱ្យប្រសើរ (Random Primer, Oligo(dT))18ថ្នាំ primer) ។
កម្មវិធីកញ្ចប់
- ប្រើដោយផ្ទាល់ក្នុង Real Time PCR ដើម្បីវិភាគបរិមាណនៃការបញ្ចេញហ្សែន
- វាអាចវិភាគបានយ៉ាងរហ័ស និងត្រឹមត្រូវនៃ RNA ដូចជាមេរោគ RNA ជាដើម។
- ការចម្លងបញ្ច្រាសនៃគំរូ RNA ដែលមានមាតិកា GC ខ្ពស់ ឬរចនាសម្ព័ន្ធបន្ទាប់បន្សំស្មុគស្មាញ
លំហូរការងារ
ការផ្ទុកនិងអាយុកាលធ្នើ
1. លក្ខខណ្ឌដឹកជញ្ជូន
ដំណើរការទាំងមូលនៃការដឹកជញ្ជូនប្រអប់ទឹកកកដែលមានសីតុណ្ហភាពទាប ដើម្បីធានាថាឧបករណ៍នេះស្ថិតក្នុងស្ថានភាព <4°C។
2. លក្ខខណ្ឌផ្ទុក
RT ងាយស្រួលTMII ត្រូវបានរក្សាទុកនៅ -20 ° C ។រក្សាទុកផលិតផលនៅក្នុងទូទឹកកកសីតុណ្ហភាពថេរនៅ -20 ° C ភ្លាមៗបន្ទាប់ពីទទួលបាន។ប្រសិនបើលក្ខខណ្ឌផ្ទុកសមស្រប ផលិតផលនឹងមិនធ្វើឱ្យខូចមុខងារណាមួយក្នុងអំឡុងពេលសុពលភាព 1 ឆ្នាំ។
