Animal Total RNA Isolation Kit កញ្ចប់ទាញយក និងបន្សុទ្ធ RNA សរុបសម្រាប់ជាលិកា និងកោសិកាសត្វ
ការពិពណ៌នាកញ្ចប់៖
ទាញយក RNA សរុបដែលមានភាពបរិសុទ្ធ និងគុណភាពខ្ពស់យ៉ាងរហ័ស និងមានប្រសិទ្ធភាពពីជាលិកាសត្វផ្សេងៗ។
មិនចាំបាច់ព្រួយបារម្ភអំពីការរិចរិល RNA ទេ។ប្រព័ន្ធទាំងមូលគឺ RNase-Free
កម្ចាត់ DNA យ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាពដោយប្រើ DNA-Cleaning Column
លុប DNA ដោយមិនចាំបាច់បន្ថែម DNase
សាមញ្ញ - ប្រតិបត្តិការទាំងអស់ត្រូវបានបញ្ចប់នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់
លឿន - ប្រតិបត្តិការអាចបញ្ចប់ក្នុងរយៈពេល 30 នាទី។
មានសុវត្ថិភាព - គ្មានសារធាតុសរីរាង្គត្រូវបានប្រើប្រាស់
ភាពបរិសុទ្ធខ្ពស់—OD260/280≈1.8-2.1
ការពិពណ៌នាអំពីកញ្ចប់
50 Preps, 200 Preps
ឈុតនេះប្រើបង្វិលជួរឈរ និងរូបមន្តបង្កើតឡើងដោយក្រុមហ៊ុនរបស់យើង ដែលអាចទាញយក RNA សរុបដែលមានភាពបរិសុទ្ធ និងគុណភាពខ្ពស់ពីជាលិកាសត្វផ្សេងៗប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់។ វាផ្តល់នូវ DNA-Cleaning Column ដ៏មានប្រសិទ្ធភាព ដែលអាចបំបែក និងស្រូបយក DNA ហ្សែនបានយ៉ាងងាយស្រួលពី supernatant និងជាលិកា lysate សាមញ្ញ និងសន្សំសំចៃពេលវេលា។RNA-only Column អាចចង RNA យ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព ហើយអាចត្រូវបានដំណើរការក្នុងពេលដំណាលគ្នាជាមួយនឹងរូបមន្តពិសេសជាច្រើននៃគំរូ។
ប្រព័ន្ធទាំងមូលគឺ RNase-Free ដូច្នេះ RNA ដែលត្រូវបានស្រង់ចេញមិនត្រូវបានបំផ្លាញទេ។Buffer RW1, Buffer RW2 buffer washing system ដូច្នេះ RNA ដែលទទួលបានគឺគ្មានប្រូតេអ៊ីន DNA អ៊ីយ៉ុង និងការបំពុលសមាសធាតុសរីរាង្គ។
សមាសធាតុនៃកញ្ចប់
| ឧបករណ៍ញែក RNA សរុបរបស់សត្វ | ||
| សមាសធាតុនៃកញ្ចប់ | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 ធ | ២០០ ធ | |
| សតិបណ្ដោះអាសន្ន RL1* | 25ml | 100ml |
| សតិបណ្ដោះអាសន្ន RL2 | 15ml | 60ml |
| Buffer RW1* | 25ml | 100ml |
| Buffer RW2 | 24ml | 96ml |
| RNase-Free ddH2O | 10ml | 40ml |
| ជួរឈរសម្រាប់តែ RNA | 50 | ២០០ |
| ជួរឈរសម្អាត DNA | 50 | ២០០ |
| សៀវភៅណែនាំ | 1 ដុំ | 1 ដុំ |
ព័ត៌មានអំពីផលិតផល
| ទម្រង់ | បង្វិលជួរឈរ | សមាសធាតុបន្សុត | ជួរឈរ Foregene, ប្រតិកម្ម |
| លំហូរ | 1-24 គំរូ | ពេលវេលាសម្រាប់ការរៀបចំ | ~ 30 នាទី (24 គំរូ) |
| ចំណុចកណ្តាល | ម៉ាស៊ីន centrifuge តុ | ការបំបែក Pyrolysis | ការបំបែក centrifugal |
| គំរូ | ជាលិកាសត្វ;ក្រឡា | បរិមាណគំរូ | ជាលិកា: 10-20 មីលីក្រាម;ក្រឡា៖ (1-5) ×106 |
| កម្រិតសំឡេងនៃការបញ្ចេញសំឡេង | 50-200 μL | បរិមាណផ្ទុកអតិបរមា | 850 μL |
លក្ខណៈពិសេស & គុណសម្បត្តិ
■ មិនចាំបាច់ព្រួយបារម្ភអំពីការរិចរិល RNA ទេ។ប្រព័ន្ធទាំងមូលគឺ RNase-Free
■ កម្ចាត់ DNA ដោយប្រើជួរឈរសម្អាត DNA យ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព
■ លុប DNA ដោយមិនចាំបាច់បន្ថែម DNase
■ ប្រតិបត្តិការសាមញ្ញទាំងអស់ត្រូវបានបញ្ចប់នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់
■ ដំណើរការលឿនអាចបញ្ចប់ក្នុងរយៈពេល 30 នាទី។
■ សុវត្ថិភាព - មិនត្រូវការសារធាតុសរីរាង្គទេ។
■ ភាពបរិសុទ្ធខ្ពស់ -OD260/280≈1.8-2.1
កម្មវិធីកញ្ចប់
វាស័ក្តិសមសម្រាប់ការស្រង់ចេញ និងការបន្សុតនៃ RNA សរុបពីជាលិកាសត្វស្រស់ ឬទឹកកក ឬកោសិកាដាំដុះ។
ប៉ារ៉ាម៉ែត្រផលិតផល
■ កម្មវិធីខាងក្រោម៖ ការសំយោគ cDNA ខ្សែទីមួយ, RT-PCR, ការក្លូនម៉ូលេគុល, Northern Blot ។ល។
■ គំរូ៖ ជាលិកាសត្វ កោសិកាវប្បធម៌
■ កំរិតប្រើ៖ ជាលិកា 10-20mg, កោសិកា(2-5)×106
■ សមត្ថភាពចង DNA អតិបរមានៃជួរឈរបន្សុត៖ 80 μg
■ បរិមាណ Elution: 50-200 μl
ដ្យាក្រាម
Animal Total RNA Isolation Kit ព្យាបាល 20mg
សំណាកកណ្តុរស្រស់ យក 5% បន្សុទ្ធ RNA សរុប 1% agar
Glycogel electrophoresis
1: Spleen 2: តម្រងនោម
៣៖ ថ្លើម ៤៖ បេះដូង
ការផ្ទុកនិងអាយុកាលធ្នើ
ឧបករណ៍នេះអាចត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងរយៈពេល 24 ខែនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (15-25 ℃) ឬ 2-8 ℃សម្រាប់រយៈពេលយូរ។Buffer RL1 អាចត្រូវបានរក្សាទុកនៅ 4 ℃ សម្រាប់រយៈពេល 1 ខែ បន្ទាប់ពីបន្ថែម β-mercaptoethanol (ជាជម្រើស)។
អត្ថបទដកស្រង់
១.IF: 18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al ។mRNA-Loaded Lipid-like Nanoparticles សម្រាប់ការកែសម្រួលមូលដ្ឋានថ្លើម តាមរយៈការធ្វើឱ្យប្រសើរនៃការរចនាសមាសធាតុកណ្តាល។Adv.មុខងារ។ម៉ែ។2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF: 18.187:He X, Hong W, Yang J, et al ។apoptosis ដោយឯកឯងនៃកោសិកាក្នុងការរៀបចំកោសិកាដើមព្យាបាល បញ្ចេញឥទ្ធិពល immunomodulatory តាមរយៈការបញ្ចេញ phosphatidylserine ។ការបញ្ជូនសញ្ញាគោលដៅ Ther ។ឆ្នាំ 2021 ខែកក្កដា 14; 6(1): 270 ។doi: 10.1038/s41392-021-00688-z ។
3.IF: 17.97៖ Dai Z, Liu H, Liao J, et al ។ការកែប្រែ N7-Methylguanosine tRNA ធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវការបកប្រែ mRNA oncogenic និងលើកកម្ពស់ការវិវត្តនៃដុំសាច់មហារីកពោះវៀនធំ។កោសិកាម៉ូល។ឆ្នាំ 2021 ថ្ងៃទី 29 ខែកក្កដា:S1097-2765(21)00555-4។doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003 ។
4.IF: 9.225៖ Cao X, Shu Y, Chen Y, et al ។ការកែប្រែ Mettl14-Mediated m6A ជួយសម្រួលដល់ការបង្កើតឡើងវិញនៃថ្លើមដោយរក្សាលំនឹង endoplasmic Reticulum Homeostasis ។កោសិកា Mol Gastroenterol Hepatol ។2021;12(2):633-651។doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001 ។
ឧបករណ៍ញែក RNA សម្រាប់ ប្រភពគំរូផ្សេងទៀត។ទំនេរ:
កោសិកា រុក្ខជាតិ មេរោគ ឈាម ។ល។
RNA មិនត្រូវបានស្រង់ចេញ ឬទិន្នផល RNA មានកម្រិតទាប
ជារឿយៗមានកត្តាជាច្រើនដែលជះឥទ្ធិពលដល់ប្រសិទ្ធភាពនៃការស្តារឡើងវិញ ដូចជា៖ ខ្លឹមសារនៃ RNA គំរូជាលិកា វិធីសាស្រ្តនៃប្រតិបត្តិការ បរិមាណ elution ជាដើម។
1. ការងូតទឹកទឹកកកឬការចាប់ផ្ចិត cryogenic (4°C) ត្រូវបានធ្វើឡើងកំឡុងពេលប្រតិបត្តិការ។
អនុសាសន៍: ដំណើរការនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (15-25 ° C) ពេញមួយដំណើរការទាំងមូល កុំងូតទឹកទឹកកក និង centrifuge នៅសីតុណ្ហភាពទាប។
2. ការរក្សាទុកគំរូមិនត្រឹមត្រូវ ឬពេលវេលាផ្ទុកសំណាកច្រើនពេក។
អនុសាសន៍៖ ទុកសំណាកនៅសីតុណ្ហភាព -80 °C ឬបង្កកក្នុងអាសូតរាវ និងជៀសវាងការប្រើទឹកកកម្តងហើយម្តងទៀត។ព្យាយាមប្រើជាលិកាស្រស់ ឬកោសិកាវប្បធម៌សម្រាប់ការទាញយក RNA ។
3. លីលីសគំរូមិនគ្រប់គ្រាន់។
អនុសាសន៍៖ នៅពេលធ្វើជាលិកាដូចគ្នា ត្រូវប្រាកដថាជាលិកាមានភាពដូចគ្នាគ្រប់គ្រាន់ ហើយកោសិកាជាលិកាត្រូវបានបំបែកគ្រប់គ្រាន់ ដើម្បីពន្យល់ពីការបញ្ចេញ RNA ។
4. ភាពវៃឆ្លាតមិនត្រូវបានបន្ថែមត្រឹមត្រូវទេ។
អនុសាសន៍៖ បញ្ជាក់ថា RNase-Free ddH2O ត្រូវបានបន្ថែមទម្លាក់តាមទិសទៅកណ្តាលនៃភ្នាសជួរឈរបន្សុត។
5. បរិមាណត្រឹមត្រូវនៃអេតាណុលដាច់ខាតមិនត្រូវបានបន្ថែមទៅ Buffer RL2 ឬ Buffer RW2 ទេ។
អនុសាសន៍៖ អនុវត្តតាមការណែនាំ បន្ថែមបរិមាណត្រឹមត្រូវនៃអេតាណុលដាច់ខាតទៅ Buffer RL2 និង Buffer RW2 ហើយលាយឱ្យបានល្អមុនពេលប្រើឧបករណ៍។
6. កំរិតប្រើសំណាកជាលិកាគឺមិនសមស្របទេ។
ការណែនាំ៖ ប្រើជាលិកា ១០-២០ មីលីក្រាម ឬ (១-៥) × ១០6កោសិកាក្នុងមួយសតិបណ្ដោះអាសន្ន 500 μl RL1 ដោយសារការប្រើប្រាស់ជាលិកាច្រើនពេកអាចបណ្តាលឱ្យកាត់បន្ថយការទាញយក RNA ។
7. បរិមាណ elution មិនត្រឹមត្រូវ ឬ elution មិនពេញលេញ។
អនុសាសន៍: បរិមាណ elution នៃជួរឈរបន្សុតគឺ 50-200 μl;ប្រសិនបើឥទ្ធិពល elution មិនពេញចិត្ត វាត្រូវបានណែនាំអោយពន្យារម៉ោងដាក់សីតុណ្ហភាពក្នុងបន្ទប់ បន្ទាប់ពីបន្ថែម RNase-Free ddH ដែលត្រូវបានកំដៅជាមុន2O, ឧទាហរណ៍សម្រាប់ 5-10 នាទី។
8. ជួរឈរបន្សុតមានសំណល់អេតាណុលបន្ទាប់ពីការលាងសម្អាត Buffer RW2 ។
ការណែនាំ៖ ប្រសិនបើមានសំណល់អេតាណុលបន្ទាប់ពីការលាងសម្អាត Buffer RW2 ការផ្ចិតបំពង់ទទេរយៈពេល 1 នាទី ពេលវេលាសម្រាប់ប្រតិបត្តិការ centrifugation បំពង់ទទេអាចកើនឡើងដល់ 2 នាទី ឬជួរឈរបន្សុតអាចដាក់នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់រយៈពេល 5 នាទី ដើម្បីដកអេតាណុលដែលនៅសល់ចេញបានគ្រប់គ្រាន់។
RNA បន្សុតត្រូវបានបំផ្លាញ
គុណភាពនៃ RNA បន្សុតគឺទាក់ទងទៅនឹងកត្តាដូចជាការរក្សាសំណាក ការចម្លងរោគ RNase និងឧបាយកលជាដើម។
1. សំណាកជាលិកាមិនត្រូវបានរក្សាទុកទាន់ពេលទេ។
អនុសាសន៍៖ ប្រសិនបើសំណាកជាលិកា ឬកោសិកាមិនត្រូវបានប្រើក្នុងលក្ខណៈទាន់ពេលវេលាបន្ទាប់ពីការប្រមូល រក្សាទុកភ្លាមៗនៅសីតុណ្ហភាព -80 °C ឬអាសូតរាវ។ដើម្បីទាញយក RNA សូមប្រើជាលិកា ឬគំរូកោសិកាដែលទើបនឹងយកនៅពេលណាដែលអាចធ្វើទៅបាន។
2. ការកកម្តងហើយម្តងទៀតនៃសំណាកជាលិកា។
អនុសាសន៍៖ នៅពេលរក្សាទុកសំណាកជាលិកា យកល្អគួរតែកាត់វាជាបំណែកតូចៗសម្រាប់ការរក្សាទុក ហើយយកបំណែកមួយចេញនៅពេលប្រើប្រាស់ ដើម្បីជៀសវាងការកកសំណាកម្តងទៀត និងការរិចរិលនៃ RNA ។
3. RNase ត្រូវបានណែនាំ ឬមិនពាក់ស្រោមដៃ របាំងមុខ។ល។ ក្នុងអំឡុងពេលប្រតិបត្តិការ។
អនុសាសន៍៖ ការពិសោធន៍ទាញយក RNA ត្រូវបានអនុវត្តយ៉ាងល្អបំផុតនៅក្នុងបន្ទប់រៀបចំ RNA ដាច់ដោយឡែក ហើយតារាងត្រូវបានសម្អាតមុនពេលពិសោធន៍។
ពាក់ស្រោមដៃ និងរបាំងដែលអាចចោលបានក្នុងអំឡុងពេលពិសោធន៍ ដើម្បីកាត់បន្ថយការរិចរិល RNA ដែលបណ្តាលមកពីការណែនាំនៃ RNase ។
4. សារធាតុ Reagents ត្រូវបានបំពុលដោយ RNase កំឡុងពេលប្រើប្រាស់។
ការណែនាំ៖ ជំនួសដោយឧបករណ៍ញែក RNA សរុបសត្វថ្មីសម្រាប់ការពិសោធន៍ពាក់ព័ន្ធ។
5. បំពង់ centrifuge, គន្លឹះ, ល. ដែលប្រើក្នុងការរៀបចំ RNA ត្រូវបានបំពុលដោយ RNase ។
អនុសាសន៍៖ បញ្ជាក់ថា បំពង់ centrifuge, គន្លឹះ, pipettes ជាដើម ដែលប្រើក្នុងការទាញយក RNA គឺសុទ្ធតែជា RNase-Free។
RNA ដែលទទួលបានបន្សុតប៉ះពាល់ដល់ការពិសោធន៍ខាងក្រោម
RNA បន្សុតដោយជួរឈរបន្សុត ប្រសិនបើអ៊ីយ៉ុងអំបិល មាតិកាប្រូតេអ៊ីនធំពេកនឹងប៉ះពាល់ដល់ការពិសោធន៍ខាងក្រោមដូចជា៖ ការចម្លងបញ្ច្រាស Northern Blot et al ។
1. RNA ដែលត្រូវបានដកចេញមានសំណល់អ៊ីយ៉ុងអំបិល។
អនុសាសន៍៖ បញ្ជាក់ថាបរិមាណអេតាណុលត្រឹមត្រូវត្រូវបានបន្ថែមទៅ Buffer RW2 និងធ្វើការលាងសម្អាតជួរឈរបន្សុតចំនួន 2 នៅល្បឿន centrifugal ដែលបានបញ្ជាក់សម្រាប់ប្រតិបត្តិការ។ប្រសិនបើមានសំណល់អ៊ីយ៉ុងអំបិល សូមទុកជួរឈរបន្សុតទៅ Buffer RW2 រយៈពេល 5 នាទីនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ហើយធ្វើ centrifugation ដើម្បីបង្កើនការយកចេញនូវភាពកខ្វក់នៃអំបិល។
2. សំណល់អេតាណុលនៅក្នុង elutioned RNA ។
អនុសាសន៍៖ បញ្ជាក់ថាបន្ទាប់ពីការលាងសតិបណ្ដោះអាសន្ន RW2 ធ្វើប្រតិបត្តិការ centrifugation បំពង់ទទេក្នុងល្បឿន centrifugation ដែលបានចង្អុលបង្ហាញសម្រាប់ប្រតិបត្តិការ បង្កើនពេលវេលានៃប្រតិបត្តិការ centrifugation បំពង់ទទេដល់ 2 នាទី ប្រសិនបើនៅមានសំណល់អេតាណុល ឬទុកវានៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់រយៈពេល 5 នាទី បន្ទាប់ពីបំពង់ទទេ ដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាពនៃ reximethan reximethan ។
