1. ដាក់ឈ្មោះមុខងាររបស់ RNA ច្រើនជាង 5?
ផ្ទេរ RNA tRNA ផ្ទេរអាស៊ីតអាមីណូ Ribosome RNA rRNA Ribosome បង្កើតជាអ្នកនាំសារ RNA mRNA គំរូសំយោគប្រូតេអ៊ីន Heterogeneous nuclear RNA hnRNA បុព្វកថានៃ mRNA ចាស់ទុំ នុយក្លេអ៊ែរតូច RNA snRNA ជាប់ពាក់ព័ន្ធនឹងការបំបែកប្រូតេអ៊ីន hnRNA តូច ស៊ីតូប្លាសស៊ីស RNA-sclotic signals/7 nition សមាសធាតុរាងកាយ Antisense RNA anRNA/micRNA គ្រប់គ្រងការបញ្ចេញហ្សែន Ribozyme RNA អង់ស៊ីមសកម្ម RNA
2. តើអ្វីជាភាពខុសគ្នាសំខាន់រវាងអ្នកផ្សព្វផ្សាយ prokaryotic និង eukaryotic?
Prokaryotic TTGACA---TATAAT------ កន្លែងចាប់ផ្តើម-35 -10 Eukaryotic Enhancer---GC ---CAAT----TATAA-5mGpp-កន្លែងចាប់ផ្តើម-110 -70 -25
3. តើអ្វីជាទិដ្ឋភាពសំខាន់នៃការសាងសង់សិប្បនិម្មិតនៃប្លាស្មាធម្មជាតិ?
plasmids ធម្មជាតិច្រើនតែមានពិការភាព ដូច្នេះវាមិនស័ក្តិសមសម្រាប់ប្រើប្រាស់ជាក្រុមហ៊ុនដឹកជញ្ជូនសម្រាប់វិស្វកម្មហ្សែនទេ ហើយត្រូវតែកែប្រែ និងសាងសង់៖ ក.បន្ថែមហ្សែនសញ្ញាសម្គាល់ជម្រើសសមស្រប ដូចជាពីរ ឬច្រើន ដែលងាយស្រួលប្រើសម្រាប់ការជ្រើសរើស ជាទូទៅហ្សែនអង់ទីប៊ីយ៉ូទិក។ខ.បង្កើន ឬបន្ថយកន្លែងកាត់អង់ស៊ីមសមស្រប ដើម្បីជួយសម្រួលដល់ការផ្សំឡើងវិញ។គ.កាត់ប្រវែងខ្លី កាត់បំណែកដែលមិនចាំបាច់ បង្កើនប្រសិទ្ធភាពនៃការនាំចូល និងបង្កើនសមត្ថភាពផ្ទុក។ឃ.ផ្លាស់ប្តូរការចម្លងពីតឹងទៅរលុង ពីច្បាប់ចម្លងតិចទៅច្បាប់ចម្លងកាន់តែច្រើន។អ៊ីបន្ថែមធាតុហ្សែនពិសេសតាមតម្រូវការពិសេសនៃវិស្វកម្មហ្សែន
4. ផ្តល់ឧទាហរណ៍នៃវិធីសាស្រ្តសម្រាប់ការពិនិត្យឌីផេរ៉ង់ស្យែលនៃ cDNA ជាក់លាក់នៃជាលិកា?
ចំនួនកោសិកាពីរត្រូវបានរៀបចំ ហ្សែនគោលដៅត្រូវបានបង្ហាញ ឬបង្ហាញយ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងកោសិកាមួយ ហើយហ្សែនគោលដៅមិនត្រូវបានបង្ហាញ ឬបង្ហាញទាបនៅក្នុងកោសិកាផ្សេងទៀត ហើយបន្ទាប់មកហ្សែនគោលដៅត្រូវបានរកឃើញដោយការបង្កាត់ និងការប្រៀបធៀប។ឧទាហរណ៍ ក្នុងអំឡុងពេលនៃការកើតឡើង និងការវិវត្តនៃដុំសាច់ កោសិកាដុំសាច់នឹងបង្ហាញ mRNAs ជាមួយនឹងកម្រិតបញ្ចេញមតិខុសពីកោសិកាធម្មតា។ដូច្នេះហ្សែនដែលទាក់ទងនឹងដុំសាច់អាចត្រូវបានពិនិត្យចេញដោយការបង្កាត់ឌីផេរ៉ង់ស្យែល។វិធីសាស្ត្រ induction ក៏អាចត្រូវបានប្រើដើម្បីពិនិត្យហ្សែនដែលការបញ្ចេញមតិត្រូវបានជម្រុញ។
5. ការបង្កើត និងការពិនិត្យកោសិកា hybridoma?
កោសិកា Spleen B + កោសិកា myeloma បន្ថែមសារធាតុ polyethylene glycol (PEG) ដើម្បីលើកកម្ពស់ការបញ្ចូលគ្នានៃកោសិកា ហើយកោសិកា B-myeloma fusion splenic ដែលលូតលាស់នៅក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុក HAT (មានផ្ទុក hypoxanthine, aminopterin, T) បន្តពង្រីកសារធាតុចិញ្ចឹម។ការលាយបញ្ចូលគ្នានៃកោសិកាមាន៖ កោសិកាស្ពែម-ស្ពែម fusion៖ មិនអាចលូតលាស់បាន កោសិកានៃលំពែងមិនអាចត្រូវបានដាំដុះនៅក្នុង vitro បានទេ។កោសិការលាយឆ្អឹង៖ មិនអាចប្រើប្រាស់អ៊ីប៉ូហ្សីនធីនបានទេ ប៉ុន្តែអាចសំយោគសារធាតុ purine តាមរយៈផ្លូវទីពីរដោយប្រើ folate reductase ។Aminopterin រារាំង folate reductase ហើយដូច្នេះមិនអាចលូតលាស់បានទេ។កោសិកាប្រសព្វឆ្អឹង៖ អាចលូតលាស់នៅក្នុង HAT កោសិកាលំពែងអាចប្រើប្រាស់ hypoxanthine ហើយកោសិកាឆ្អឹងផ្តល់នូវមុខងារបែងចែកកោសិកា។
6. តើអ្វីជាគោលការណ៍ និងវិធីសាស្រ្តនៃការកំណត់រចនាសម្ព័ន្ធចម្បងនៃ DNA ដោយវិធីសាស្ត្របញ្ចប់ស្ថានីយ Dideoxy (វិធីសាស្ត្រ Sanger)?
គោលការណ៍គឺត្រូវប្រើឧបករណ៍បញ្ចប់ខ្សែសង្វាក់ nucleotide-2,,3,-dideoxynucleotide ដើម្បីបញ្ចប់ផ្នែកបន្ថែមនៃ DNA ។ដោយសារវាខ្វះ 3-OH ដែលត្រូវការសម្រាប់ការបង្កើតចំណង 3/5/phosphodiester នៅពេលបញ្ចូលទៅក្នុងខ្សែសង្វាក់ DNA ខ្សែសង្វាក់ DNA មិនអាចពង្រីកបន្ថែមទៀតបានទេ។យោងតាមគោលការណ៍នៃការផ្គូផ្គងមូលដ្ឋាន នៅពេលណាដែល DNA polymerase ត្រូវការ dNMP ដើម្បីចូលរួមក្នុងខ្សែសង្វាក់ DNA ដែលត្រូវបានពង្រីកជាធម្មតា មានលទ្ធភាពពីរ គឺមួយគឺការចូលរួមក្នុង ddNTP ដែលជាលទ្ធផលក្នុងការបញ្ចប់នៃផ្នែកបន្ថែមខ្សែសង្វាក់ deoxynucleotide ។មួយទៀតគឺការចូលរួមក្នុង dNTP ដូច្នេះខ្សែសង្វាក់ DNA នៅតែអាចបន្តពង្រីករហូតដល់ ddNTP បន្ទាប់ត្រូវបានបញ្ចូល។យោងតាមវិធីសាស្ត្រនេះ ក្រុមនៃបំណែក DNA ដែលមានប្រវែងខុសៗគ្នាដែលបញ្ចប់ដោយ ddNTP អាចទទួលបាន។វិធីសាស្រ្តគឺបែងចែកជាបួនក្រុមរៀងៗខ្លួន ddAMP, ddGMP, ddCMP, និង ddTMP ។បន្ទាប់ពីប្រតិកម្ម, អេឡិចត្រិចជែល polyacrylamide អាចអានលំដាប់ DNA យោងទៅតាមក្រុមហែលទឹក។
7. តើអ្វីជាឥទ្ធិពលបទប្បញ្ញត្តិវិជ្ជមាននៃប្រូតេអ៊ីនសកម្ម (CAP) នៅលើការចម្លង?
Cyclic adenylate (cAMP) receptor protein CRP (cAMP receptor protein) ស្មុគស្មាញដែលបង្កើតឡើងដោយការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ cAMP និង CRP ត្រូវបានគេហៅថា CAP (cAMPactivated protein) ។នៅពេលដែល E. coli ត្រូវបានដាំដុះក្នុងកម្រិតមធ្យមដែលខ្វះជាតិគ្លុយកូស ការសំយោគនៃ CAP កើនឡើង ហើយ CAP មានមុខងារនៃការធ្វើឱ្យសកម្មរបស់ភ្នាក់ងារផ្សព្វផ្សាយដូចជា lactose (Lac) ។អ្នកផ្សព្វផ្សាយដែលពឹងផ្អែកលើ CRP មួយចំនួនខ្វះលក្ខណៈពិសេសលំដាប់តំបន់ -35 ធម្មតា (TTGACA) ដែលអ្នកផ្សព្វផ្សាយទូទៅមាន។ដូច្នេះវាពិបាកសម្រាប់ RNA polymerase ក្នុងការភ្ជាប់ទៅនឹងវា។វត្តមានរបស់ CAP (មុខងារ)៖ អាចធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវភាពជាប់ស្អិតរបស់អង់ស៊ីម និងប្រូម៉ូសិន។វាបង្ហាញជាចម្បងនូវទិដ្ឋភាពពីរខាងក្រោម៖ ① CAP ជួយឱ្យម៉ូលេគុលអង់ស៊ីមតម្រង់ទិសបានត្រឹមត្រូវ ដោយផ្លាស់ប្តូរការអនុលោមតាមអ្នកផ្សព្វផ្សាយ និងអន្តរកម្មជាមួយអង់ស៊ីម ដូច្នេះដើម្បីផ្សំជាមួយតំបន់ -10 និងដើរតួនាទីជំនួសមុខងារនៃតំបន់ -35 ។②CAP ក៏អាចរារាំងការភ្ជាប់នៃ RNA polymerase ទៅនឹងកន្លែងផ្សេងទៀតនៅក្នុង DNA ផងដែរ ដោយហេតុនេះបង្កើនប្រូបាប៊ីលីតេនៃការចងភ្ជាប់ទៅនឹងអ្នកផ្សព្វផ្សាយជាក់លាក់របស់វា។
8. តើជំហានអ្វីខ្លះដែលជាធម្មតាត្រូវបានរួមបញ្ចូលនៅក្នុងការពិសោធន៍ការផ្សំ DNA ធម្មតា?
ក.ស្រង់ហ្សែនគោលដៅ (ឬហ្សែនខាងក្រៅ) នៃសារពាង្គកាយម្ចាស់ជំនួយ ហើយភ្ជាប់អង់ស៊ីមវាទៅនឹងម៉ូលេគុល DNA មួយផ្សេងទៀត (វ៉ិចទ័រក្លូន) ដើម្បីបង្កើតជាម៉ូលេគុល DNA ដែលផ្សំគ្នាថ្មី។ខ.ផ្ទេរម៉ូលេគុល DNA ដែលផ្សំគ្នាទៅក្នុងកោសិកាអ្នកទទួល ហើយចម្លង និងរក្សាទុកវានៅក្នុងកោសិកាអ្នកទទួល។ដំណើរការនេះត្រូវបានគេហៅថាការផ្លាស់ប្តូរ។គ.អេក្រង់ និងកំណត់អត្តសញ្ញាណកោសិកាអ្នកទទួលទាំងនោះ ដែលបានស្រូបយក DNA ដែលផ្សំឡើងវិញ។ឃ.វប្បធម៌ដ៏ធំនៃកោសិកាដែលមាន DNA ផ្សំឡើងវិញ ដើម្បីរកមើលថាតើហ្សែនជំនួយបរទេសត្រូវបានបង្ហាញឬអត់។
9. ការសាងសង់បណ្ណាល័យហ្សែន វិធីសាស្ត្របីយ៉ាងសម្រាប់ការពិនិត្យមើលសារធាតុផ្សំឡើងវិញត្រូវបានផ្តល់ឱ្យ ហើយដំណើរការនេះត្រូវបានពិពណ៌នាដោយសង្ខេប។
ការពិនិត្យភាពធន់នឹងថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិច ភាពអសកម្មនៃការទប់ទល់ ការពិនិត្យលើចំណុចពណ៌ខៀវ-ស ឬការពិនិត្យ PCR ការពិនិត្យឌីផេរ៉ង់ស្យែល ការស៊ើបអង្កេត DNA វ៉ិចទ័រក្លូនភាគច្រើនមានហ្សែនធន់នឹងថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិច (ប្រឆាំងនឹងអាំពីស៊ីលីន តេត្រាស៊ីគ្លីន)។នៅពេលដែល plasmid ត្រូវបានផ្ទេរចូលទៅក្នុង Escherichia coli បាក់តេរីនឹងទទួលបានភាពធន់ទ្រាំ ហើយអ្នកដែលមិនមានការផ្ទេរនឹងមិនមានភាពធន់ទ្រាំទេ។ប៉ុន្តែ​វា​មិន​អាច​បែងចែក​បាន​ថា​តើ​វា​ត្រូវ​បាន​រៀបចំ​ឡើង​វិញ​ឬ​ក៏​អត់។នៅក្នុងវ៉ិចទ័រដែលមានហ្សែនធន់ទ្រាំពីរ ប្រសិនបើបំណែក DNA បរទេសត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងហ្សែនមួយ ហើយធ្វើឱ្យហ្សែននេះអសកម្ម ការគ្រប់គ្រងចានពីរដែលមានថ្នាំផ្សេងគ្នាអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីពិនិត្យរកសារធាតុផ្សំឡើងវិញវិជ្ជមាន។ឧទាហរណ៍ pUC plasmid មានផ្ទុកហ្សែន LacZ (ការអ៊ិនកូដ β-galactosidase) ដែលអាចបំផ្លាញស្រទាប់ខាងក្រោម chromogenic X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) ដើម្បីបង្កើតពណ៌ខៀវ ដូច្នេះការប្រែពណ៌ពណ៌ខៀវ។នៅពេលដែល DNA បរទេសត្រូវបានបញ្ចូល ហ្សែន LacZ មិនអាចបង្ហាញបានទេ ហើយសំពាធមានពណ៌ស ដើម្បីពិនិត្យបាក់តេរីដែលផ្សំឡើងវិញ។
10. ពន្យល់ពីដំណើរការជាមូលដ្ឋាននៃការទទួលបានសត្វឆ្លងតាមរយៈកោសិកាដើមអំប្រ៊ីយ៉ុង?
កោសិកាដើមអំប្រ៊ីយ៉ុង (ES) គឺជាកោសិកាអំប្រ៊ីយ៉ុងកំឡុងពេលបង្កើតអំប្រ៊ីយ៉ុង ដែលអាចត្រូវបានដាំដុះដោយសិប្បនិម្មិត និងរីកសាយ និងមានមុខងារនៃការបែងចែកទៅជាប្រភេទកោសិកាផ្សេងទៀត។វប្បធម៌នៃកោសិកា ES៖ ម៉ាស់កោសិកាខាងក្នុងនៃ blastocyst ត្រូវបានញែកដាច់ពីគ្នា និងត្រូវបានដាំដុះ។នៅពេលដែល ES ត្រូវបានដាំដុះនៅក្នុងស្រទាប់ដែលគ្មានចំណី វានឹងបែងចែកទៅជាកោសិកាមុខងារផ្សេងៗដូចជាកោសិកាសាច់ដុំ និងកោសិកា N។នៅពេលដាំដុះនៅក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុកដែលមានសារធាតុ fibroblasts ES នឹងរក្សាមុខងារនៃភាពខុសគ្នា។ES អាច​ត្រូវ​បាន​រៀបចំ​ដោយ​ហ្សែន ហើយ​មុខងារ​ខុសគ្នា​របស់​វា​អាច​ត្រូវ​បាន​រួម​បញ្ចូល​ដោយ​មិន​ប៉ះពាល់​ដល់​មុខងារ​ខុសគ្នា​របស់​វា ដែល​អាច​ដោះស្រាយ​បញ្ហា​នៃ​ការ​រួម​បញ្ចូល​ដោយ​ចៃដន្យ។ណែនាំហ្សែនខាងក្រៅចូលទៅក្នុងកោសិកាដើមអំប្រ៊ីយ៉ុង បន្ទាប់មកបញ្ចូលទៅក្នុងស្បូនរបស់សត្វកណ្ដុរដែលមានផ្ទៃពោះ អភិវឌ្ឍទៅជាកូនឆ្កែ និងឆ្លងដើម្បីទទួលបានសត្វកណ្តុរដែលមានលក្ខណៈដូចគ្នា។