Plant Total RNA Isolation Kit បូកសរុប RNA Purificaiton Kit សម្រាប់រុក្ខជាតិដែលសំបូរទៅដោយសារធាតុ Polysaccharides និង Polyphenols
ការពិពណ៌នាកញ្ចប់៖
Cat.No.RE-05021/05022/05024
សម្រាប់ការបន្សុត RNA សរុបពីសំណាករុក្ខជាតិទូទៅដែលមានសមាសធាតុ polysaccharide និង polyphenol ខ្ពស់។
ទាញយក RNA សរុបដែលមានគុណភាពខ្ពស់យ៉ាងឆាប់រហ័សពីគំរូរុក្ខជាតិជាមួយនឹងមាតិកាខ្ពស់នៃ polysaccharides និង polyphenols ។
RNase-Free ដោយប្រើ DNA-Cleaning Column
សាមញ្ញ - ប្រតិបត្តិការទាំងអស់ត្រូវបានបញ្ចប់នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់
លឿន - ប្រតិបត្តិការអាចបញ្ចប់ក្នុងរយៈពេល 30 នាទី។
មានសុវត្ថិភាព - គ្មានសារធាតុសរីរាង្គត្រូវបានប្រើប្រាស់ 
លក្ខណៈបច្ចេកទេស
50 Preps, 200 Preps
កញ្ចប់ប្រើជួរឈរបង្វិល និងរូបមន្តដែលបង្កើតឡើងដោយ Foregene ដែលអាចទាញយក RNA សរុបដែលមានភាពបរិសុទ្ធ និងគុណភាពខ្ពស់យ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាពពីជាលិការុក្ខជាតិផ្សេងៗដែលមានសារធាតុ polysaccharides ឬ polyphenols ខ្ពស់។វាផ្តល់នូវជួរឈរ DNA-Cleaning ដែលអាចយកចេញ DNA ហ្សែនបានយ៉ាងងាយស្រួលពី supernatant និងជាលិកា lysate ។ជួរឈរតែ RNA អាចភ្ជាប់ RNA យ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព។ឧបករណ៍នេះអាចដំណើរការគំរូមួយចំនួនធំក្នុងពេលតែមួយ។
ប្រព័ន្ធទាំងមូលមិនមាន RNase ទេ ដូច្នេះ RNA បន្សុតនឹងមិនត្រូវបានបំផ្លិចបំផ្លាញទេ។Buffer PRW1 និង Buffer PRW2 អាចធានាថា RNA ដែលទទួលបានមិនត្រូវបានបំពុលដោយប្រូតេអ៊ីន DNA អ៊ីយ៉ុង និងសមាសធាតុសរីរាង្គ។
សមាសធាតុនៃកញ្ចប់
| Buffer PSL1, Buffer PS, Buffer PSL2 |
| Buffer PRW1, Buffer PRW2 |
| RNase-Free ddH2អូ ជួរឈរសម្អាត DNA |
| RNA-Only Column |
លក្ខណៈពិសេស & គុណសម្បត្តិ
■ ប្រតិបត្តិការនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (15-25 ℃) ពេញមួយដំណើរការទាំងមូល ដោយមិនមានការងូតទឹកកក និង centrifugation សីតុណ្ហភាពទាប។
■ កញ្ចប់ពេញលេញ RNase-Free មិនចាំបាច់ព្រួយបារម្ភអំពីការរិចរិល RNA ទេ។
■ ជាពិសេសគឺសមរម្យសម្រាប់ការបន្សុត RNA ពីសំណាករុក្ខជាតិនៃសារធាតុ polysaccharides និង polyphenols ។
■ DNA-Cleaning Column ភ្ជាប់យ៉ាងពិសេសទៅនឹង DNA ដូច្នេះកញ្ចប់អាចលុបការចម្លងរោគ DNA ហ្សែនដោយមិនចាំបាច់បន្ថែម DNase ។
■ ទិន្នផល RNA ខ្ពស់៖ ជួរឈរតែ RNA និងរូបមន្តតែមួយគត់អាចបន្សុទ្ធ RNA ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព។
■ ល្បឿនលឿន៖ ងាយស្រួលក្នុងការដំណើរការ និងអាចបញ្ចប់ក្នុងរយៈពេល 30 នាទី។
■ សុវត្ថិភាព៖ មិនទាមទារសារធាតុសរីរាង្គទេ។
■ គុណភាពខ្ពស់៖ បំណែក RNA បន្សុតមានភាពបរិសុទ្ធខ្ពស់ គ្មានប្រូតេអ៊ីន និងសារធាតុមិនបរិសុទ្ធផ្សេងទៀត ហើយអាចបំពេញតាមកម្មវិធីពិសោធន៍ខាងក្រោមផ្សេងៗ។
ប៉ារ៉ាម៉ែត្រផលិតផល
■ កម្មវិធីខាងក្រោម៖ ការសំយោគ cDNA ខ្សែទីមួយ, RT-PCR, ការក្លូនម៉ូលេគុល, Northern Blot ។ល។
■ គំរូ៖ ជាលិការុក្ខជាតិស្រស់ ឬកកនៃសារធាតុ polysaccharides និង polyphenols
■ កំរិតប្រើៈ 50mg ជាលិការុក្ខជាតិ
■ សមត្ថភាពចង RNA អតិបរមានៃជួរឈរបន្សុត៖ 80 μg
■ បរិមាណ Elution: 50-200 μl
កម្មវិធីកញ្ចប់
វាស័ក្តិសមសម្រាប់ការស្រង់ចេញ និងការបន្សុតនៃ RNA សរុបពីសំណាកជាលិការុក្ខជាតិស្រស់ ឬទឹកកក (ជាពិសេសជាលិកាស្លឹករុក្ខជាតិស្រស់) ជាមួយនឹងសារធាតុ polysaccharide និង polyphenol ខ្ពស់។
លំហូរការងារ
ដ្យាក្រាម
Plant Total RNA Isolation Kit Plus បានដំណើរការស្លឹកស្រស់ 50mg នៃសារធាតុ polysaccharides និង polyphenols ហើយ 5% RNA បន្សុតត្រូវបានធ្វើតេស្តដោយ electrophoresis ។
១៖ ចេក
២៖ ជីងហ្គោ
៣៖ កប្បាស
៤៖ ផ្លែទទឹម
ការផ្ទុកនិងអាយុកាលធ្នើ
ឧបករណ៍នេះអាចត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងរយៈពេល 24 ខែក្រោមលក្ខខណ្ឌស្ងួតនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (15-25 ℃);ប្រសិនបើវាត្រូវរក្សាទុកក្នុងរយៈពេលយូរជាងនេះ វាអាចរក្សាទុកក្នុងសីតុណ្ហភាព 2-8 ℃។
Buffer PSL1 អាចត្រូវបានដាក់នៅសីតុណ្ហភាព 4 ℃ សម្រាប់រយៈពេល 1 ខែបន្ទាប់ពីការបន្ថែម β-mercaptoethanol (វាត្រូវបានណែនាំឱ្យបន្ថែមវាក្នុងពេលតែមួយនៃការពិសោធន៍) ។
ជួរឈរត្រូវបានដោត
បន្ទាប់ពីដោតជួរឈរ ទិន្នផល RNA ត្រូវបានកាត់បន្ថយ ឬមិនអាចបន្សុទ្ធ RNA បានទេ ហើយម៉ាស់ RNA ដែលទទួលបានគឺទាប។
ការវិភាគមូលហេតុទូទៅ៖
1. ការបំបែកគំរូមិនហ្មត់ចត់។
ការបំបែកគំរូមិនបណ្តាលឱ្យ ADN-CLEANING COLUMN ត្រូវបានរារាំងទាំងស្រុងនោះទេ ខណៈពេលដែលប៉ះពាល់ដល់ទិន្នផល និងគុណភាព RNA ។យើងសូមណែនាំឱ្យមានប្រតិបត្តិការកិនយ៉ាងរហ័សក្នុងបរិមាណអាសូតរាវគ្រប់គ្រាន់នៅពេលដែលអ្នកបំបែកសំណាកគំរូ ព្យាយាមកំទេចជញ្ជាំងកោសិកាគំរូ ភ្នាសកោសិកា និងជាលិកាផ្សេងទៀត។សម្រាប់សំណាករុក្ខជាតិនៃប៉ូលីយ៉ូលប៉ូលីសេកការីត យើងសូមណែនាំឱ្យអ្នកប្រើ Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS ។
2. នៅពេលដែលបឺតយកវត្ថុរាវលើសសំណាកដែលបំបែកចេញជាមួយនឹងជួរឈរសម្អាត DNA នោះ សារធាតុ precipitate ដែលបែកខ្ញែកនៃកោសិកាអាចនឹងត្រូវបានស្រូបចូល។
សំណល់ក្រឡាដែលបែកខ្ញែកដែលយកនឹងបណ្តាលឱ្យជួរឈរ RNA-ONLY ដែលនឹងត្រូវបានរារាំងនៅពេលប្រតិបត្តិការនៃការស្រូបយក RNA ត្រូវបានអនុវត្ត (សូមមើលជំហានទី 6) ។យើងណែនាំអ្នកដោយប្រុងប្រយ័ត្ននៅពេលបឺតសារធាតុ supernatant នេះ ដើម្បីជៀសវាងការជញ្ជក់កំទេចកំទីកោសិកា។
3. ចំនួនទឹកប្រាក់ដំបូងគំរូគឺច្រើនពេក។
ការប្រើប្រាស់សំណាកច្រើនហួសហេតុនឹងនាំឱ្យមានការបំបែកគំរូមិនពេញលេញ ឬការវិភាគកោសិកាមិនពេញលេញដោយ Buffer PSL1 ដែលបណ្តាលឱ្យមានការស្ទះនៃជួរឈរបន្សុតកំឡុងពេលបន្សុត។Plant Total RNA Isolation Kit គំរូប្រតិបត្តិការដែលបានបន្សុតតែមួយគឺ 50 មីលីក្រាម។សម្រាប់សំណាករុក្ខជាតិនៃប៉ូលីយ៉ូលប៉ូលីសេកការីត យើងសូមណែនាំឱ្យអ្នកសាកល្បង Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS ។
4. សីតុណ្ហភាពនៃ centrifuge គឺទាបពេក។
ដំណើរការនៃការញែក RNA ទាំងមូល និងការបន្សុតត្រូវបានអនុវត្តនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (20-25°គ) លើកលែងតែជាលិកាគំរូត្រូវបានខូចដោយអាសូតរាវ។℃ដែលអាចបណ្តាលឱ្យមានការស្ទះនៃ DNA-Cleaning Column និង/ឬ RNA-Only Column ។ប្រសិនបើរឿងនេះកើតឡើងសូមកំណត់សីតុណ្ហភាព centrifuge ទៅ 20-25℃, និងត្រូវប្រាកដថាល្បាយលីហ្សីស និង/ឬសារធាតុបន្ថែមអេតាណុលត្រូវបានកំដៅមុនដល់ ៣៧°C.
គ្មាន RNA ស្រង់ចេញ ឬទិន្នផល RNA ទាប
ជាធម្មតាមានកត្តាជាច្រើនដែលប៉ះពាល់ដល់ប្រសិទ្ធភាពនៃការស្តារឡើងវិញ ដូចជា៖ មាតិកា RNA គំរូ វិធីសាស្ត្រប្រតិបត្តិការ បរិមាណ elution ជាដើម។
ការវិភាគមូលហេតុទូទៅដូចខាងក្រោមៈ
1. ការងូតទឹកទឹកកក ឬការចាប់ផ្ចិតនៅសីតុណ្ហភាពទាប (4°C) ត្រូវបានធ្វើក្នុងកំឡុងពេលប្រតិបត្តិការ។
ការណែនាំ៖ ដំណើរការនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (១៥-២៥°គ) ក្នុងដំណើរការទាំងមូល មិនត្រូវធ្វើអាងងូតទឹកទឹកកក និងការផ្ចិតនៅសីតុណ្ហភាពទាបឡើយ។
2.RNA ត្រូវបានបង្ខូចដោយសារការរក្សាសំណាកមិនត្រឹមត្រូវ ឬការរក្សាទុកគំរូរយៈពេលវែង។
អនុសាសន៍៖ សំណាកដែលប្រមូលបានថ្មីៗគួរត្រូវបានកកយ៉ាងលឿនក្នុងអាសូតរាវ ហើយបន្ទាប់មករក្សាទុកនៅ -80°C ក្នុងរយៈពេលយូរ ជៀសវាងការបង្កក និងរលាយសំណាកម្តងហើយម្តងទៀត។ឬត្រាំគំរូភ្លាមៗនៅក្នុងដំណោះស្រាយស្ថេរភាព RNA RNAlater (គំរូសត្វ) ។
3.ការបែកខ្ចាត់ខ្ចាយនៃគំរូមិនគ្រប់គ្រាន់ និងលីសនាំឱ្យស្ទះនៃជួរឈរបន្សុត។
ការណែនាំ៖ នៅពេលកិនជាលិកា សូមប្រាកដថា ជាលិកាមានដីគ្រប់គ្រាន់ ហើយផ្ទេរវាទៅ Buffer PSL1 ដែលបានរៀបចំជាមុន (សូមបញ្ជាក់ថាសមាមាត្រត្រឹមត្រូវនៃ β-ME ត្រូវបានបន្ថែម សូមមើលជំហានទី 1 នៃនីតិវិធី)។
4.The eluent ត្រូវបានបន្ថែមមិនត្រឹមត្រូវ។
ការណែនាំ៖ ត្រូវប្រាកដថា RNase-Free ddH2O ត្រូវបានទម្លាក់ចូលទៅក្នុងពាក់កណ្តាលនៃភ្នាសជួរឈរបន្សុត។
5.បរិមាណត្រឹមត្រូវនៃអេតាណុលដាច់ខាតមិនត្រូវបានបន្ថែមទៅ Buffer PSL2 ឬ Buffer PRW2 ទេ។
ការណែនាំ៖ សូមធ្វើតាមការណែនាំ បន្ថែមបរិមាណត្រឹមត្រូវនៃអេតាណុលដាច់ខាតទៅ Buffer PSL2 និង Buffer PRW2 ហើយលាយឱ្យបានល្អមុនពេលឧបករណ៍ប្រើប្រាស់។
6.បរិមាណនៃគំរូជាលិកាគឺមិនសមរម្យ។
ការណែនាំ៖ ប្រើ 50 mg នៃជាលិកាក្នុង 500 μl នៃ Buffer PSL1 ។ការប្រើប្រាស់ជាលិកាច្រើនពេកនឹងកាត់បន្ថយបរិមាណ RNA ដែលត្រូវបានស្រង់ចេញ ហើយភាពបរិសុទ្ធនៃ RNA លទ្ធផលក៏នឹងត្រូវបានកាត់បន្ថយផងដែរ។យើងសូមផ្តល់អនុសាសន៍យ៉ាងមុតមាំថាកិតើគំរូដំបូងមិនគួរលើសពី 50 មីលីក្រាមក្នុងមួយប្រតិបត្តិការដក RNA ទេ។
7. បរិមាណ elution មិនសមរម្យ ឬ elution មិនពេញលេញ។
ការណែនាំ: បរិមាណដ៏ច្រើននៃជួរឈរបន្សុតគឺ 50-200 μl;ប្រសិនបើឥទ្ធិពល elution មិនពេញចិត្ត វាត្រូវបានណែនាំអោយពង្រីកពេលវេលានៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ បន្ទាប់ពីបន្ថែម RNase-Free ddH2O ដែលបានកំដៅមុន ដូចជា 5-10min ។
8. ជួរឈរបន្សុតមានសំណល់អេតាណុលបន្ទាប់ពីលាងជាមួយ BufferPRW2 ។
ការណែនាំ៖ ប្រសិនបើបំពង់ទទេត្រូវបាន centrifuged រយៈពេល 1 នាទី ហើយនៅតែមានអេតាណុលដែលនៅសល់ បន្ទាប់ពីលាងសម្អាតនៅក្នុង Buffer PRW2 អ្នកអាចបង្កើនពេលវេលានៃការ centrifugation បំពង់ទទេដល់ 2 នាទី ឬដាក់ជួរឈរបន្សុតនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់រយៈពេល 5 នាទី ដើម្បីដកអេតាណុលដែលនៅសេសសល់ចេញ។
9. កញ្ចប់ត្រូវបានប្រើប្រាស់មិនត្រឹមត្រូវ។
ការណែនាំ៖ សម្រាប់សំណាករុក្ខជាតិនៃសារធាតុប៉ូលីហ្វេណុលប៉ូលីសេកការីត ការប្រើឧបករណ៍ទូទៅដូចជា Plant Total RNA Isolation Kit ប្រហែលជាមិនអាចទទួលបានសំណាក RNA ដ៏ល្អនោះទេ។យើងណែនាំអ្នកឱ្យប្រើ Plant Total RNA IsolationKit Plus ដែលត្រូវបានរចនាឡើងជាពិសេសសម្រាប់គំរូរុក្ខជាតិ polyphenolic polysaccharide ។ឧបករណ៍ដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងជាពិសេសសម្រាប់ការទាញយក RNA ពីគំរូរុក្ខជាតិ polyphenol និង polysaccharide ។
តម្លៃ OD260/OD280 ទាប
RNA elution ជាមួយ ddH2O និងប្រើសម្រាប់ការអាន spectrophotometer នាំឱ្យតម្លៃ OD260/OD280 ទាប។យើងសូមណែនាំឱ្យប្រើ 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (ជាជាង RNase-Free ddH2O ដើម្បីបន្លំ RNA) ដើម្បីទទួលបានតម្លៃ OD260/OD280 ដែលត្រឹមត្រូវ សូមមើល "ការវិភាគការផ្តោតអារម្មណ៍ និងការបន្សុត RNA" នៅទំព័រ 19 ។
RNA បន្សុតត្រូវបានបំផ្លាញ
គុណភាពនៃ RNA បន្សុតគឺទាក់ទងទៅនឹងកត្តាដូចជាការរក្សាគំរូ ការចម្លងរោគ RNase និងការរៀបចំ។
ការវិភាគមូលហេតុទូទៅ៖
1.សំណាកជាលិកាមិនត្រូវបានរក្សាទុកទាន់ពេលវេលាបន្ទាប់ពីការប្រមូល។
អនុសាសន៍៖ ប្រសិនបើសំណាកជាលិកាមិនត្រូវបានគេប្រើប្រាស់ទាន់ពេលបន្ទាប់ពីការប្រមូល សូមទុកវានៅក្នុងអាសូតរាវនៅសីតុណ្ហភាពទាបភ្លាមៗ ឬផ្ទេរវាទៅ -80°C សម្រាប់ការរក្សាទុករយៈពេលវែង បន្ទាប់ពីត្រជាក់រហ័សក្នុងអាសូតរាវ ឬជ្រមុជគំរូភ្លាមៗនៅក្នុងដំណោះស្រាយស្ថេរភាព RNA RNAlater (គំរូសត្វ)។សម្រាប់ការទាញយក RNA សូមព្យាយាមប្រើសំណាកជាលិកាដែលប្រមូលបានថ្មីៗ។
2. ការបង្កកម្តងហើយម្តងទៀត និងរលាយនៃសំណាកជាលិកា។
ការណែនាំ៖ នៅពេលរក្សាទុកសំណាកជាលិកា យកល្អគួរតែកាត់វាជាបំណែកតូចៗសម្រាប់រក្សាទុក ហើយយកផ្នែកខ្លះចេញនៅពេលប្រើប្រាស់ ដើម្បីជៀសវាងការរិចរិលនៃ RNA ដែលបណ្តាលមកពីការបង្កក និងការរលាយនៃសំណាកម្តងហើយម្តងទៀត។
3.RNase ត្រូវបានណែនាំនៅក្នុងបន្ទប់វះកាត់ ឬមិនពាក់ស្រោមដៃ ម៉ាស។ល។
ការណែនាំ៖ ការពិសោធន៍ទាញយក RNA ត្រូវបានអនុវត្តយ៉ាងល្អបំផុតនៅក្នុងប្រតិបត្តិការ RNA ដាច់ដោយឡែក ហើយតារាងមន្ទីរពិសោធន៍គួរតែត្រូវបានសម្អាតមុនពេលពិសោធន៍ ហើយស្រោមដៃ និងរបាំងដែលអាចចោលបានគួរតែត្រូវបានពាក់ក្នុងអំឡុងពេលពិសោធន៍ ដើម្បីជៀសវាងការរិចរិល RNA ដែលបណ្តាលមកពីការណែនាំ RNase ក្នុងកម្រិតធំបំផុត។
4. សារធាតុប្រតិកម្មត្រូវបានបំពុលដោយ RNase កំឡុងពេលប្រើប្រាស់។
ការណែនាំ៖ ជំនួសដោយស៊េរីថ្មីនៃឧបករណ៍ទាញយក RNA សរុបរបស់រុក្ខជាតិសម្រាប់ការពិសោធន៍ពាក់ព័ន្ធ។
5. បំពង់ centrifuge និង pipette ដែលប្រើសម្រាប់ការរៀបចំ RNA ត្រូវបានបំពុលដោយ RNase ។
ការណែនាំ៖ សូមប្រាកដថា បំពង់ centrifuge, pipette, pipettes, etc. ដែលប្រើក្នុងការទាញយក RNA គឺ RNase-Free ទាំងអស់។
សៀវភៅណែនាំ៖
Plant Total RNA Isolation Kit Plus សៀវភៅណែនាំណែនាំ
