QuickEasyᵀᴹ ពេលវេលាពិត PCR Kit-Taqman
ការពិពណ៌នាកញ្ចប់៖
◮ប្រព័ន្ធបង្កើនប្រសិទ្ធភាព PCR តែមួយគត់ធ្វើឱ្យ 2 × QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman កាន់តែឆបគ្នា។
◮Hot-start Foregene HS Taq Polymerase មានប្រសិទ្ធភាព amplification ខ្ពស់ ភាពរសើបនៃ amplification ខ្ពស់ និងភាពជាក់លាក់នៃ amplification ខ្ពស់ជាង។
◮2 × QuickEasyTMReal PCR Mix -Taqman ប្រើប្រាស់ប្រព័ន្ធពិសេសមួយដែលត្រូវបានកែលម្អដោយ Foregene ដើម្បីបង្កើនភាពប្រែប្រួល និងភាពជាក់លាក់នៃការរកឃើញការស៊ើបអង្កេតតាមលំដាប់ ដែលអាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការកំណត់បំរែបំរួលលេខហ្សែន និងចម្លង និងទទួលបានលទ្ធផលត្រឹមត្រូវ។
◮ផលិតផលនេះភ្ជាប់មកជាមួយថ្នាំជ្រលក់ពណ៌យោងខាងក្នុង ROX ដែលអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីលុបបំបាត់ផ្ទៃខាងក្រោយសញ្ញា និងកំហុសសញ្ញារវាងអណ្តូង ដែលងាយស្រួលសម្រាប់អតិថិជនក្នុងការប្រើប្រាស់ឧបករណ៍ PCR បរិមាណផ្សេងៗគ្នា។
ការពិពណ៌នា
2 × QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman ផ្តល់ដោយ QuickEasyTMឧបករណ៍ PCR Kit-Taqman ពេលវេលាពិតគឺជាប្រព័ន្ធលាយមេជំនាន់ថ្មីដែលត្រូវបានរចនាឡើងសម្រាប់ប្រតិកម្មពង្រីក PCR ពេលវេលាពិតប្រាកដដោយប្រើការស៊ើបអង្កេត fluorescent ជាក់លាក់។ស្នូល Foregene HS Taq DNA Polymerase របស់វាគឺផ្អែកលើការកែប្រែអង្គបដិប្រាណ ដែលប្រើជាមួយប្រព័ន្ធ PCR ដែលត្រូវបានធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងបន្ថែមទៀត Foregene មានភាពជាក់លាក់ខ្ពស់ និងប្រសិទ្ធភាពពង្រីក។បើប្រៀបធៀបជាមួយល្បាយ PCR ធម្មតា វាមានសមត្ថភាពពង្រីកខ្លាំងជាង និងអត្រាមិនស៊ីគ្នាទាបជាង។វាអាចត្រូវបានប្រើនៅក្នុងប្រតិកម្ម PCR បរិមាណ fluorescence ដើម្បីកាត់បន្ថយការពង្រីកមិនជាក់លាក់ និងធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវភាពត្រឹមត្រូវនៃ PCR ។វាអាចធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងយ៉ាងខ្លាំងនូវភាពជាក់លាក់នៃផលិតផល និងភាពប្រែប្រួលនៃប្រតិកម្ម។ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ ROX ត្រូវបានផ្តល់ជូនជាថ្នាំជ្រលក់យោងខាងក្នុង។
QuickEasyTMឧបករណ៍ PCR Kit-Taqman ពេលវេលាពិតមានវិសាលភាពទូលំទូលាយនៃការអនុវត្តចំពោះបរិមាណនៃគំរូ ហើយអាចទទួលបានខ្សែកោងស្តង់ដារល្អនៅក្នុងតំបន់បរិមាណផ្សេងៗគ្នា ហើយអាចកំណត់បរិមាណ និងរកឃើញហ្សែនគោលដៅបានយ៉ាងត្រឹមត្រូវជាមួយនឹងភាពដដែលៗ និងទំនុកចិត្តខ្ពស់។
លក្ខណៈបច្ចេកទេស
200 ត្រៀម,500 ត្រៀម,ការត្រៀមរៀបចំ 1000,2000 ការរៀបចំ
សមាសធាតុនៃកញ្ចប់
| QuickEasyTMពេលវេលាពិត PCR Kit-Taqman(២០μlប្រព័ន្ធ) | ||||
| មាតិកាកញ្ចប់ | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 Preps | 500 ត្រៀម | 1000 ត្រៀម | 2000 ការរៀបចំ | |
| 2 ×រហ័សងាយស្រួលTM PCR ពិតប្រាកដ លាយ- តាកម៉ាន់ | 1 មីលីលីត្រ×2 | 1.7 មីលីលីត្រ×3 | 1.7 មីលីលីត្រ×6 | 1.7 មីលីលីត្រ×12 |
| 20×ថ្នាំជ្រលក់យោង ROX | ២០០μL | 0.5 មីលីលីត្រ | 1 មីលីលីត្រ | 1 មីលីលីត្រ×2 |
| DNase-Free ddH2O | 1.7 មីលីលីត្រ | 1.7 មីលីលីត្រ×2 | 10 មីលីលីត្រ | 20 មីលីលីត្រ |
| ប្រសិនបើអ្នក | 1ដុំ | 1ដុំ | 1ដុំ | 1ដុំ |
លក្ខណៈពិសេស & គុណសម្បត្តិ
■ ប្រព័ន្ធបង្កើនប្រសិទ្ធភាព PCR តែមួយគត់ធ្វើឱ្យ 2 × QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman កាន់តែឆបគ្នា។
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase មានប្រសិទ្ធភាព amplification ខ្ពស់ ភាពរសើបនៃ amplification ខ្ពស់ និងភាពជាក់លាក់នៃ amplification ខ្ពស់ជាង។
■ ២× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman ប្រើប្រាស់ប្រព័ន្ធពិសេសមួយដែលត្រូវបានកែលម្អដោយ Foregene ដើម្បីបង្កើនភាពប្រែប្រួល និងភាពជាក់លាក់នៃការរកឃើញការស៊ើបអង្កេតតាមលំដាប់ ដែលអាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការកំណត់បំរែបំរួលលេខហ្សែន និងចម្លង និងទទួលបានលទ្ធផលត្រឹមត្រូវ។
■ ផលិតផលនេះភ្ជាប់មកជាមួយថ្នាំជ្រលក់ពណ៌យោងខាងក្នុង ROX ដែលអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីលុបបំបាត់ផ្ទៃខាងក្រោយសញ្ញា និងកំហុសសញ្ញារវាងអណ្តូង ដែលងាយស្រួលសម្រាប់អតិថិជនក្នុងការប្រើប្រាស់ឧបករណ៍ PCR បរិមាណផ្សេងៗគ្នា។
កម្មវិធីកញ្ចប់
■ PCR បរិមាណ fluorescence សម្រាប់ការវិភាគបរិមាណគំរូ;
■ គការពង្រីក PCR ធម្មតា;
■ អាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការរកឃើញ allele.
ការផ្ទុកនិងអាយុកាលធ្នើ
ឧបករណ៍គួរតែត្រូវបានរក្សាទុកនៅ -20 ° C នៅក្នុងទីងងឹត;ប្រសិនបើវាត្រូវបានប្រើញឹកញាប់ វាក៏អាចរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 4°C ក្នុងរយៈពេលខ្លីផងដែរ (ប្រើក្នុងរយៈពេល 10 ថ្ងៃ)។
គោលការណ៍នៃការរចនាបឋម PCR ពេលវេលាពិត
Primer ទៅមុខ និង បញ្ច្រាស primer
សម្រាប់ PCR ពេលវេលាពិត ការរចនាបឋមមានសារៈសំខាន់ណាស់។Primers ត្រូវបានទាក់ទងទៅនឹងភាពជាក់លាក់ និងប្រសិទ្ធភាពនៃការពង្រីក PCR ហើយអាចត្រូវបានរចនាដោយយោងទៅលើគោលការណ៍ដូចខាងក្រោមៈ
ប្រវែង primer: 18-30bp ។
មាតិកា GC: 40-60% ។
តម្លៃ Tm៖ កម្មវិធីរចនាបឋម ដូចជា Primer 5 អាចផ្តល់តម្លៃ Tm នៃ primer ។តម្លៃ Tm នៃ primers ខាងលើ និងខាងក្រោមគួរតែនៅជិតបំផុតតាមដែលអាចធ្វើទៅបាន។រូបមន្តគណនា Tm ក៏អាចប្រើបានដែរ៖ Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T) ។នៅពេលអនុវត្ត PCR សីតុណ្ហភាពក្រោមតម្លៃ primer Tm នៃ 5 ° C ជាទូទៅត្រូវបានជ្រើសរើសជាសីតុណ្ហភាព annealing (ការកើនឡើងដែលត្រូវគ្នានៃសីតុណ្ហភាព annealing អាចបង្កើនភាពជាក់លាក់នៃប្រតិកម្ម PCR) ។
ថ្នាំ primers និង PCR ផលិតផល៖
ប្រវែងផលិតផលពង្រីក PCR primer គឺល្អជាង 100-150bp ។
ការរចនា primers នៅក្នុងតំបន់រចនាសម្ព័ន្ធបន្ទាប់បន្សំនៃគំរូគួរតែត្រូវបានជៀសវាងឱ្យបានច្រើនតាមដែលអាចធ្វើទៅបាន។
ជៀសវាងការបង្កើតមូលដ្ឋានបំពេញបន្ថែម 2 ឬច្រើនរវាងចុង 3′ នៃ primers ខាងលើ និងខាងក្រោម។
មូលដ្ឋានស្ថានីយ Primer 3′ មិនអាចមានវត្តមានជាមួយ G ឬ C ជាប់គ្នា 3 បន្ថែមទេ។
ថ្នាំ primers ខ្លួនឯងមិនអាចមានរចនាសម្ព័ន្ធបំពេញបន្ថែមទេបើមិនដូច្នេះទេរចនាសម្ព័ន្ធសក់នឹងត្រូវបានបង្កើតឡើងដែលប៉ះពាល់ដល់ការពង្រីក PCR ។
ATCG គួរតែត្រូវបានចែកចាយស្មើៗគ្នាតាមដែលអាចធ្វើទៅបាននៅក្នុងលំដាប់បឋម ហើយមូលដ្ឋានស្ថានីយ 3′ គួរតែត្រូវបានជៀសវាងដូចជា T.
ឧបសម្ព័ន្ធទី 1៖ កញ្ចប់បន្ថែមសមាសភាគ Cell Direct RT-qPCR
1.ដំណោះស្រាយកោសិកាលីស
|
| |||
| សមាសធាតុនៃកញ្ចប់ (ប្រព័ន្ធលីលីស ២៤-អណ្តូង) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 ធ | 500 ធ | ||
| ផ្នែកI | Buffer CL | 20 មីលីលីត្រ | 100 មីលីលីត្រ |
| Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 មីលីលីត្រ × 2 | |
| Buffer ST | 1 មីលីលីត្រ × 2 | 10 មីលីលីត្រ | |
| ផ្នែកII | ជ័រលុប DNA | 400 μl | 1 មីលីលីត្រ × 2 |
2.RT លាយ
|
| |
| សមាសធាតុនៃកញ្ចប់ (ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម 20 μl) | DRT-01011-B1 |
| ២០០ ធ | |
| 5 × ល្បាយ RT ផ្ទាល់ | 800 μl |
| RNase-Free ddH2O | 1.7ml × 2 |
|
| ||
| សមាសធាតុនៃកញ្ចប់ (ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| ២០០ ធ | 1000 ធ | |
| 2 × ផ្ទាល់ qPCR Mix-SYBR | 1 មីលីលីត្រ × 2 | 1.7ml × 6 |
| 50 × ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
| RNase-Free ddH2O | 1.7 មីលីលីត្រ | 10 មីលីលីត្រ |
