សមាមាត្រទាបនៃ A260/A230 ជាធម្មតាបណ្តាលមកពីភាពមិនបរិសុទ្ធជាមួយនឹងរលកស្រូបយកអតិបរមានៅ 230nm ។តោះមើលអ្វីដែលមិនបរិសុទ្ធទាំងនេះរួមមាន:

• ការបំពុលទូទៅ	ប្រវែងរលកស្រូបយក	ឥទ្ធិពលសមាមាត្រ
  ប្រូតេអ៊ីន	~ 230nm និង 280nm	ការកាត់បន្ថយក្នុងពេលដំណាលគ្នានៃ A២៦០/A ២៨០និង A២៦០/A ២៨០សមាមាត្រ
  អំបិល Guanidine	220-240 nm	កាត់បន្ថយ A២៦០/A ២៨០សមាមាត្រ
  ភេនណុល	~ 270nm	-
  ទ្រីហ្សូល។	~ 230nm និង 270nm	កាត់បន្ថយ A២៦០/A ២៨០សមាមាត្រ
  EDTA	~ ២៣០ nm	កាត់បន្ថយ A២៦០/A ២៨០សមាមាត្រ
  អេតាណុល	230-240 nm	កាត់បន្ថយ A២៦០/A ២៨០សមាមាត្រ

 
 
 
រលកស្រូបទាញ និងតម្លៃកម្រិតពណ៌នៃសារធាតុបំពុលទូទៅ

Pការចម្លងរោគ rotein
ការបំពុលប្រូតេអ៊ីនអាចត្រូវបានចាត់ទុកថាជាការបំពុលទូទៅបំផុតនៅក្នុងដំណើរការនៃការទាញយកអាស៊ីត nucleic ។ប្រូតេអ៊ីន​មាន​នៅ​ចន្លោះ​ដំណាក់កាល​ទឹក​ខាងលើ​និង​ខាងក្រោម​សរីរាង្គដំណាក់កាល។ការបំពុលនឹងកាត់បន្ថយសមាមាត្រនៃ A260/A280 និង A260/A230 ក្នុងពេលតែមួយ ហើយសមាមាត្រនៃ A260/A230 នឹងផ្លាស់ប្តូរច្បាស់ជាងសមាមាត្រនៃ A260/A280 ។
ក្នុងអំឡុងពេលបន្តបន្ទាប់ប្រតិចារិកបញ្ច្រាសor ប្រតិកម្ម qPCR, សំណល់ប្រូតេអ៊ីនអាចរារាំង ឬរំខានដល់មុខងារអង់ស៊ីម.មធ្យោបាយដ៏ល្អបំផុតដើម្បីជៀសវាងការចម្លងរោគប្រូតេអ៊ីនគឺត្រូវចងចាំគោលការណ៍នៃ "តិចជាងច្រើន ជាចំនួនតិចតួចជាច្រើនដង" នៅពេលប្រាថ្នាចង់បាន supernatant ។

2. ការបំពុល Guanidinium
hydrochloride (GuHCl) និង guanidine thiocyanate (GTC) មានឥទ្ធិពលនៃប្រូតេអ៊ីន denaturing ដែលអាចបំផ្លាញភ្នាសកោសិកាយ៉ាងឆាប់រហ័សក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការទាញយកអាស៊ីត nucleic បណ្តាលឱ្យខូចប្រូតេអ៊ីន និងទឹកភ្លៀង។រលកស្រូបទាញរបស់ GuHCl និង GTC ស្ថិតនៅចន្លោះ 220-240 nm និងអំបិល guanidinium ដែលនៅសល់នឹងកាត់បន្ថយសមាមាត្រនៃ A260/A230.ទោះបីជាអំបិល guanidinium ដែលនៅសល់នឹងកាត់បន្ថយសមាមាត្រក៏ដោយផលប៉ះពាល់លើការពិសោធន៍ខាងក្រោមពិតជាមានសេចក្តីធ្វេសប្រហែស.

3. ការចម្លងរោគ Trizol
សមាសធាតុសំខាន់នៃ Trizol គឺ phenol ។មុខងារចម្បងរបស់ phenol គឺដើម្បីបញ្ចេញកោសិកា lyse និងបញ្ចេញប្រូតេអ៊ីន និងសារធាតុអាស៊ីត nucleic នៅក្នុងកោសិកា។ទោះបីជា phenol អាចបញ្ចេញប្រូតេអ៊ីនយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាពក៏ដោយ ក៏វាមិនអាចរារាំងសកម្មភាព RNase ទាំងស្រុងបានទេ។ដូច្នេះ 8-hydroxyquinoline , guanidine isothiocyanate , β-mercaptoethanol ជាដើម ត្រូវបានបន្ថែមទៅ TRIzol ដើម្បីទប់ស្កាត់ RNase ដែលគ្មានជាតិគីមី និង exogenous ។
នៅពេលស្រង់ចេញ RNA កោសិកា Trizol អាច lyse កោសិកាយ៉ាងឆាប់រហ័ស និងរារាំង nuclease ដែលបញ្ចេញចេញពីកោសិកា ហើយ Trizol ដែលនៅសល់នឹងកាត់បន្ថយសមាមាត្រ A260/A230 យ៉ាងខ្លាំង។
វិធីសាស្រ្តកែច្នៃ៖ នៅពេលដាក់ centrifuging វាត្រូវតែត្រូវបានកត់សម្គាល់ថា phenol នៅក្នុង Trizol គឺងាយស្រួលរលាយក្នុងដំណាក់កាលទឹកក្រោមលក្ខខណ្ឌនៃ 4 °និងសីតុណ្ហភាពបន្ទប់។

4. សំណល់អេតាណុល
អេតាណុល​ត្រូវ​បាន​ប្រើ​នៅ​ក្នុង​ដំណើរ​ការ​ចុង​ក្រោយ​ដើម្បី​ precipitate DNA ខណៈ​ពេល​ដែល​រំលាយ​អ៊ីយ៉ុង​អំបិល​ដែល​អាច​នឹង​ត្រូវ​បាន​ចង​ទៅ​នឹង DNA ។រលកស្រូបយកខ្ពស់បំផុតកំពូលនៃការស្រូបយកអេតាណុលក៏មាននៅ 230-240 nm ដែលក៏នឹងកាត់បន្ថយសមាមាត្រ A260/A230 ផងដែរ។.
វិធីសាស្រ្តនៃការជៀសវាងសំណល់អេតាណុលអាចត្រូវបានធ្វើម្តងទៀតពីរដងក្នុងអំឡុងពេល elution ចុងក្រោយដោយផ្លុំនៅក្នុងក្រណាត់ផ្សែងសម្រាប់រយៈពេលពីរនាទីដើម្បីឱ្យអេតាណុលហួតបានពេញលេញ មុនពេលបន្ថែមសតិបណ្ដោះអាសន្នសម្រាប់ការ elution ។
ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយ វាគួរតែត្រូវបានគេដឹងថា សមាមាត្រគ្រាន់តែជាសន្ទស្សន៍វាយតម្លៃគុណភាព RNA ប៉ុណ្ណោះ។ប្រសិនបើប្រតិបត្តិការដែលបានរៀបរាប់ខាងលើត្រូវបានគ្រប់គ្រងយ៉ាងតឹងរ៉ឹង គម្លាតរវាងសមាមាត្រ និងជួរស្តង់ដារនឹងមិនមានឥទ្ធិពលខ្លាំងលើការពិសោធន៍ខាងក្រោមឡើយ។
ផលិតផលដែលពាក់ព័ន្ធ៖
ឧបករណ៍ញែក RNA សរុបរបស់សត្វ
Plant Total RNA Isolation Kit
ឧបករណ៍ញែកកោសិកា RNA សរុប
Plant Total RNA Isolation Kit Plus