ឧបករណ៍ញែក RNA ឈាម
ការពិពណ៌នា
កញ្ចប់ទទួលយកនូវជួរឈរបង្វិល និងរូបមន្តដែលបង្កើតឡើងដោយក្រុមហ៊ុនរបស់យើង ដែលអាចទាញយក RNA សរុបដែលមានភាពបរិសុទ្ធ និងគុណភាពខ្ពស់ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពពីឈាមទាំងមូលដែលប្រឆាំងនឹងការកកឈាម។កញ្ចប់នេះផ្តល់នូវ lysate កោសិកាឈាមក្រហម (Buffer RCL) ដែលអាច lyse កោសិកាឈាមក្រហមយ៉ាងឆាប់រហ័ស និងមានប្រសិទ្ធិភាព និងរក្សាកោសិកាឈាមស។DNA-Cleaning Colunm ដ៏មានប្រសិទ្ធភាពអាចបំបែកកោសិកា supernatant និង lysates យ៉ាងងាយស្រួល ហើយស្រូបយក និងយក DNA ហ្សែនចេញ។ប្រតិបត្តិការគឺសាមញ្ញនិងសន្សំសំចៃពេលវេលា;ជួរឈរតែមួយគត់ RNA អាចចង RNA ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព ហើយជាមួយនឹងរូបមន្តតែមួយគត់ វាអាចដំណើរការគំរូមួយចំនួនធំក្នុងពេលតែមួយ។
ប្រព័ន្ធទាំងមូល RNase-Free ធ្វើឱ្យ RNA ស្រង់ចេញមិនអាចបំបែកបាន។ប្រព័ន្ធលាងសតិបណ្ដោះអាសន្ន Buffer RW1 និង Buffer RW2 ធ្វើឱ្យ RNA ដែលទទួលបានមិនមានប្រូតេអ៊ីន DNA អ៊ីយ៉ុង និងការបំពុលសមាសធាតុសរីរាង្គ។
មាតិកាកញ្ចប់
កញ្ចប់ឈាមសរុប RNA ដាច់ដោយឡែក | ||
សមាសភាពកញ្ចប់ | RE-04011 | RE-04013 |
50 ដង | 200 ដង | |
Buffer RCL (10 ×) | 52.5 មីលីលីត្រ | 210 មីលីលីត្រ |
សតិបណ្ដោះអាសន្ន BRL1* | 30 មីលីលីត្រ | 120 មីលីលីត្រ |
សតិបណ្ដោះអាសន្ន BRL2 | 18 មីលីលីត្រ | 66 មីលីលីត្រ |
Buffer RW1* | 25 មីលីលីត្រ | 100 មីលីលីត្រ |
Buffer RW2 | 24 មីលីលីត្រ | 96 មីលីលីត្រ |
RNase-Free ddH2 O | 10 មីលីលីត្រ | 40 មីលីលីត្រ |
ជួរឈរសម្រាប់តែ RNA | ៥០ ឈុត | 200 ឈុត |
ជួរឈរសម្អាត DNA | ៥០ ឈុត | 200 ឈុត |
ហត្ថកម្ម | 1 ច្បាប់ចម្លង | 1 ច្បាប់ចម្លង |
លក្ខណៈពិសេស & គុណសម្បត្តិ
- មិនចាំបាច់ព្រួយបារម្ភអំពីការរិចរិល RNA ទេ។កញ្ចប់ទាំងមូលគឺ RNase-Free ។
សាមញ្ញ - ប្រតិបត្តិការទាំងអស់ត្រូវបានបញ្ចប់នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់។
- លឿន - ប្រតិបត្តិការអាចបញ្ចប់ក្នុងរយៈពេល 20 នាទី។
- ទិន្នផល RNA ខ្ពស់៖ ជួរឈរតែ RNA និងរូបមន្តតែមួយគត់អាចបន្សុទ្ធ RNA ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព។
សុវត្ថិភាព - គ្មានសារធាតុសរីរាង្គត្រូវបានប្រើប្រាស់។
- សមត្ថភាពដំណើរការគំរូធំ - គំរូរហូតដល់ 200μl អាចត្រូវបានដំណើរការរាល់ពេល។
-គុណភាពខ្ពស់ - RNA បន្សុតគឺមានភាពបរិសុទ្ធខ្ពស់ គ្មានប្រូតេអ៊ីន និងសារធាតុមិនបរិសុទ្ធផ្សេងទៀត ហើយអាចបំពេញតាមកម្មវិធីពិសោធន៍ខាងក្រោមផ្សេងៗ។
ប៉ារ៉ាម៉ែត្រកញ្ចប់
កញ្ចប់កម្មវិធី៖
វាស័ក្តិសមសម្រាប់ការស្រង់ចេញ និងការបន្សុតនៃ RNA សរុបពីឈាមទាំងមូលរបស់ថនិកសត្វ។
លំហូរការងារ
លក្ខខណ្ឌផ្ទុក
Buffer RCL (10 ×) គួរតែត្រូវបានរក្សាទុកនៅ 2-8 ℃ ;សមាសធាតុផ្សេងទៀតនៃកញ្ចប់អាចត្រូវបានរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (15-25 ℃) ក្រោមលក្ខខណ្ឌស្ងួត ហើយអាចរក្សាទុកបានរយៈពេល 12 ខែ។Buffer BRL1 អាចរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 4 ℃រយៈពេល 1 ខែបន្ទាប់ពីបន្ថែម β-mercaptoethanol (ជាជម្រើស) ។
ចំណាំ៖ ប្រសិនបើទុកនៅសីតុណ្ហភាពទាប ដំណោះស្រាយងាយនឹងធ្លាក់ភ្លៀង។ត្រូវប្រាកដថាដាក់សូលុយស្យុងនៅក្នុងឧបករណ៍នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់សម្រាប់រយៈពេលមួយមុនពេលប្រើប្រាស់។បើចាំបាច់ ត្រូវកំដៅវាក្នុងទឹក ៣៧ អង្សារសេ ទុករយៈពេល ១០ នាទី ដើម្បីរំលាយទឹកភ្លៀង ហើយលាយឱ្យសព្វមុនពេលប្រើប្រាស់។
ការណែនាំសម្រាប់ការវិភាគបញ្ហា
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail:Tech@foregene.com。
គ្មាន RNA អាចត្រូវបានស្រង់ចេញឬទិន្នផលនៃអាស៊ីត nucleic មានកម្រិតទាប
ជាធម្មតាមានកត្តាជាច្រើនដែលប៉ះពាល់ដល់ប្រសិទ្ធភាពនៃការស្តារឡើងវិញ ដូចជា៖ មាតិកា RNA គំរូ វិធីសាស្រ្តនៃប្រតិបត្តិការ បរិមាណ elution ជាដើម។
ការវិភាគមូលហេតុទូទៅ៖
1. ការងូតទឹកកក ឬ centrifugation សីតុណ្ហភាពទាប (4 ° C) កំឡុងពេលប្រតិបត្តិការ។
ការណែនាំ៖ ប្រតិបត្តិការសីតុណ្ហភាពក្នុងបន្ទប់ (១៥-២៥ អង្សារសេ) មិនត្រូវងូតទឹកទឹកកក និងម៉ាស៊ីនត្រជាក់សីតុណ្ហភាពទាបឡើយ។
2. ការផ្ទុកគំរូមិនត្រឹមត្រូវ ឬការផ្ទុកគំរូយូរពេក។
ការណែនាំ៖ ទុកសំណាកគំរូនៅ -80 ° C ឬបង្កកក្នុងអាសូតរាវ ហើយជៀសវាងការប្រើទឹកកកម្តងហើយម្តងទៀត។ព្យាយាមប្រើសំណាកដែលប្រមូលបានថ្មីៗសម្រាប់ការទាញយក RNA ។
3.Lys គំរូមិនគ្រប់គ្រាន់
អនុសាសន៍៖ សូមប្រាកដថាសំណាក និងដំណោះស្រាយដំណើរការ (Linear Acrylamide) ត្រូវបានលាយបញ្ចូលគ្នាយ៉ាងហ្មត់ចត់ និង incubated រយៈពេល 10 នាទីនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (15-25 ° C)
4.The eluent ត្រូវបានបន្ថែមមិនត្រឹមត្រូវ
អនុសាសន៍៖ ត្រូវប្រាកដថា RNase-Free ddH2O ត្រូវបានបន្ថែមទៅពាក់កណ្តាលនៃភ្នាសនៃជួរឈរបន្សុត។
5. បរិមាណអេតាណុលគ្មានជាតិទឹកមិនត្រឹមត្រូវនៅក្នុង Buffer viRW2
ការណែនាំ៖ សូមធ្វើតាមការណែនាំ បន្ថែមបរិមាណត្រឹមត្រូវនៃអេតាណុលគ្មានជាតិទឹកទៅក្នុង Buffer viRW2 ហើយលាយវាឱ្យបានល្អមុនពេលប្រើឧបករណ៍។
6. ការប្រើប្រាស់គំរូមិនត្រឹមត្រូវ។
ការណែនាំ៖ 200µl នៃគំរូក្នុង 500μl នៃ Buffer viRL ។បរិមាណសំណាកច្រើនហួសប្រមាណនឹងនាំឱ្យអត្រាការទាញយក RNA ថយចុះ។
7.Improper elution volume ឬ elution មិនពេញលេញ។
ការណែនាំ: បរិមាណដ៏ច្រើននៃជួរឈរបន្សុតគឺ 30-50μl;ប្រសិនបើឥទ្ធិពល elution មិនពេញចិត្ត វាត្រូវបានណែនាំឱ្យបន្ថែម RNase-Free ddH ដែលត្រូវបានកំដៅជាមុន2O និងពង្រីកពេលវេលាដាក់នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ដូចជា 5-10min
8.Purification column មានសំណល់អេតាណុលបន្ទាប់ពីលាងសម្អាតនៅក្នុង Buffer viRW2។
ការណែនាំ៖ ប្រសិនបើអេតាណុលនៅតែមានបន្ទាប់ពីការលាងសម្អាតនៅក្នុង Buffer viRW2 និង centrifugation បំពង់ទទេរយៈពេល 2 នាទី នោះជួរឈរបន្សុតអាចទុកចោលនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់រយៈពេល 5 នាទីបន្ទាប់ពីការ centrifugation បំពង់ទទេដើម្បីយកអេតាណុលដែលនៅសល់ចេញ។
ការរិចរិលនៃម៉ូលេគុល RNA បន្សុត
គុណភាពនៃ RNA បន្សុតគឺទាក់ទងទៅនឹងកត្តាដូចជាការផ្ទុកគំរូ ការចម្លងរោគ RNase និងប្រតិបត្តិការ។
ការវិភាគមូលហេតុទូទៅ៖
1.គំរូដែលប្រមូលបានមិនត្រូវបានរក្សាទុកទាន់ពេលទេ។
ការណែនាំ: ប្រសិនបើគំរូមិនត្រូវបានប្រើក្នុងពេលវេលាបន្ទាប់ពីការប្រមូលសូមទុកវានៅ -80 ℃ឬអាសូតរាវភ្លាមៗ។សម្រាប់ការទាញយកម៉ូលេគុល RNA ព្យាយាមប្រើសំណាកដែលប្រមូលបានថ្មីៗនៅពេលណាដែលអាចធ្វើទៅបាន។
2.សំណាកដែលប្រមូលបានត្រូវត្រជាក់ និងរលាយម្តងហើយម្តងទៀត។
ការណែនាំ៖ ជៀសវាងការបង្កក និងការរលាយម្តងហើយម្តងទៀត (មិនលើសពីមួយដង) កំឡុងពេលប្រមូល និងរក្សាទុកគំរូ បើមិនដូច្នេះទេ ទិន្នផលនៃអាស៊ីត nucleic នឹងថយចុះ។
3.RNase ត្រូវបានណែនាំនៅក្នុងបន្ទប់វះកាត់ ឬគ្មានស្រោមដៃ របាំងមុខ ជាដើមត្រូវបានពាក់។
ការណែនាំ៖ ការទាញយកការពិសោធន៍ម៉ូលេគុល RNA ត្រូវបានអនុវត្តយ៉ាងល្អបំផុតនៅក្នុងបន្ទប់ប្រតិបត្តិការ RNA ដាច់ដោយឡែក ហើយតារាងពិសោធន៍ត្រូវបានសម្អាតមុនពេលពិសោធន៍។ពាក់ស្រោមដៃ និងរបាំងដែលអាចចោលបានក្នុងអំឡុងពេលពិសោធន៍ ដើម្បីជៀសវាងការរិចរិល RNA ដែលបណ្តាលមកពីការណែនាំ RNase ។
4. សារធាតុប្រតិកម្មត្រូវបានបំពុលដោយ RNase កំឡុងពេលប្រើប្រាស់។
ការណែនាំ៖ ជំនួសដោយ Viral RNA Isolation Kit ថ្មីសម្រាប់ការពិសោធន៍ដែលពាក់ព័ន្ធ។
5.The RNase contamination of the centrifuge tubes, pipette tips,ល
ម៉ូលេគុល RNA បន្សុតបានប៉ះពាល់ដល់ការពិសោធន៍ខាងក្រោម
ម៉ូលេគុល RNA ដែលត្រូវបានបន្សុតដោយជួរឈរបន្សុតនឹងប៉ះពាល់ដល់ការពិសោធន៍ខាងក្រោម ប្រសិនបើមានអ៊ីយ៉ុងអំបិល ឬប្រូតេអ៊ីនច្រើនពេក ដូចជា៖ ការចម្លងបញ្ច្រាស បូលីតខាងជើង ជាដើម។
1. មានអ៊ីយ៉ុងអំបិលដែលនៅសល់នៅក្នុងម៉ូលេគុល RNA ដែលត្រូវបានដកចេញ។
អនុសាសន៍៖ ត្រូវប្រាកដថាបរិមាណអេតាណុលគ្មានជាតិទឹកត្រឹមត្រូវត្រូវបានបន្ថែមទៅ Buffer viRW2 ហើយលាងសម្អាតជួរឈរបន្សុតពីរដងតាមល្បឿន centrifugation ត្រឹមត្រូវតាមការណែនាំប្រតិបត្តិការ។បន្ទាប់មកធ្វើការ centrifugation ដើម្បីលុបការបំពុលអ៊ីយ៉ុងអំបិលក្នុងកម្រិតធំបំផុត
2. មានអេតាណុលដែលនៅសល់នៅក្នុងម៉ូលេគុល RNA ដែលត្រូវបានដកចេញ
ការណែនាំ៖ នៅពេលដែលបញ្ជាក់ថា ជួរឈរបន្សុតត្រូវបានលាងសម្អាតដោយ Buffer viRW2 ធ្វើការ centrifugation បំពង់ទទេ យោងទៅតាមល្បឿន centrifugal នៅលើការណែនាំប្រតិបត្តិការ។ប្រសិនបើនៅមានអេតាណុលនៅសេសសល់ វាអាចត្រូវបានទុកចោលរយៈពេល 5 នាទីនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ បន្ទាប់ពីការ centrifugation បំពង់ទទេ ដើម្បីយកអេតាណុលដែលនៅសេសសល់ចេញក្នុងកម្រិតធំបំផុត។
សៀវភៅណែនាំ៖
សៀវភៅណែនាំអំពី Viral RNA Isolation Kit