ក្រុមហ៊ុនផលិតរបស់ចិនសម្រាប់ 2 × Concentrated Premix សម្រាប់គំរូដែលមិនបានបន្សុតតាមពេលវេលាជាក់ស្តែង Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U
The organization keeps on the procedure concept “scientific management, high quality and effective efficiency primacy, buyer supreme for China Manufacturer for 2× Concentrated Premix for Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Our business is dedicated to giving customers with significant and secure top quality products at each customer and services at aggressive price.
អង្គការរក្សាលើគោលគំនិតនីតិវិធី "ការគ្រប់គ្រងបែបវិទ្យាសាស្ត្រ គុណភាពខ្ពស់ និងប្រសិទ្ធភាព primacy កំពូលអ្នកទិញសម្រាប់ប្រទេសចិន Taq DNA Polymerase និង Qpcr, ក្រុមហ៊ុនរបស់យើងមានកម្លាំងច្រើនក្រៃលែង និងមានប្រព័ន្ធបណ្តាញលក់ប្រកបដោយស្ថិរភាព និងល្អឥតខ្ចោះ។យើងសូមជូនពរឱ្យយើងអាចបង្កើតទំនាក់ទំនងអាជីវកម្មល្អជាមួយអតិថិជនទាំងអស់ពីក្នុងប្រទេស និងក្រៅប្រទេសដោយផ្អែកលើអត្ថប្រយោជន៍ទៅវិញទៅមក។
គោលការណ៍នៃការរចនាបឋម PCR ពេលវេលាពិត
Primer ទៅមុខ និង បញ្ច្រាស primer
សម្រាប់ PCR ពេលវេលាពិត ការរចនាបឋមមានសារៈសំខាន់ណាស់។Primers ត្រូវបានទាក់ទងទៅនឹងភាពជាក់លាក់ និងប្រសិទ្ធភាពនៃការពង្រីក PCR ហើយអាចត្រូវបានរចនាដោយយោងទៅលើគោលការណ៍ដូចខាងក្រោមៈ
- ប្រវែង primer: 18-30bp ។
- មាតិកា GC: 40-60% ។
- តម្លៃ Tm៖ កម្មវិធីរចនាបឋម ដូចជា Primer 5 អាចផ្តល់តម្លៃ Tm នៃ primer ។តម្លៃ Tm នៃ primers ខាងលើ និងខាងក្រោមគួរតែនៅជិតបំផុតតាមដែលអាចធ្វើទៅបាន។រូបមន្តគណនា Tm ក៏អាចប្រើបានដែរ៖ Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T) ។នៅពេលអនុវត្ត PCR សីតុណ្ហភាពក្រោមតម្លៃ primer Tm នៃ 5 ° C ជាទូទៅត្រូវបានជ្រើសរើសជាសីតុណ្ហភាព annealing (ការកើនឡើងដែលត្រូវគ្នានៃសីតុណ្ហភាព annealing អាចបង្កើនភាពជាក់លាក់នៃប្រតិកម្ម PCR) ។
- ថ្នាំ primers និង PCR ផលិតផល៖
- ប្រវែងផលិតផលពង្រីក PCR primer គឺល្អជាង 100-150bp ។
- ការរចនា primers នៅក្នុងតំបន់រចនាសម្ព័ន្ធបន្ទាប់បន្សំនៃគំរូគួរតែត្រូវបានជៀសវាងឱ្យបានច្រើនតាមដែលអាចធ្វើទៅបាន។
- ជៀសវាងការបង្កើតមូលដ្ឋានបំពេញបន្ថែម 2 ឬច្រើនរវាងចុង 3′ នៃ primers ខាងលើ និងខាងក្រោម។
- មូលដ្ឋានស្ថានីយ Primer 3′ មិនអាចមានវត្តមានជាមួយ G ឬ C ជាប់គ្នា 3 បន្ថែមទេ។
- ថ្នាំ primers ខ្លួនឯងមិនអាចមានរចនាសម្ព័ន្ធបំពេញបន្ថែមទេបើមិនដូច្នេះទេរចនាសម្ព័ន្ធសក់នឹងត្រូវបានបង្កើតឡើងដែលប៉ះពាល់ដល់ការពង្រីក PCR ។
- ATCG គួរតែត្រូវបានចែកចាយស្មើៗគ្នាតាមដែលអាចធ្វើទៅបាននៅក្នុងលំដាប់បឋម ហើយមូលដ្ឋានស្ថានីយ 3′ គួរតែត្រូវបានជៀសវាងដូចជា T.
ឧបសម្ព័ន្ធ១៖ គដោយផ្ទាល់RT-qPCR សំណុំសមាសធាតុt កញ្ចប់បន្ថែម
1.Cell Lysis Solution
ដំណោះស្រាយកោសិកាលីស | |||
សមាសធាតុនៃកញ្ចប់ (ប្រព័ន្ធលីលីស ២៤-អណ្តូង) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ធ | 500 ធ | ||
ផ្នែកI | Buffer CL | 20 មីលីលីត្រ | 100 មីលីលីត្រ |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 មីលីលីត្រ × 2 | |
Buffer ST | 1 មីលីលីត្រ × 2 | 10 មីលីលីត្រ | |
ផ្នែកII | ជ័រលុប DNA | 400 μl | 1 មីលីលីត្រ × 2 |
RT លាយ | |
សមាសធាតុនៃកញ្ចប់ (ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម 20 μl) | DRT-01011-B1 |
២០០ ធ | |
5 × ល្បាយ RT ផ្ទាល់ | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7ml × 2 |
qPCR លាយ | ||
សមាសធាតុនៃកញ្ចប់ (ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
២០០ ធ | 1000 ធ | |
2 × ផ្ទាល់ qPCR Mix-Taqman | 1 មីលីលីត្រ × 2 | 1.7ml × 6 |
20 × ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 មីលីលីត្រ | 10 មីលីលីត្រ |
The organization keeps on the procedure concept “scientific management, high quality and effective efficiency primacy, buyer supreme for China Manufacturer for 2× Concentrated Premix for Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Our business is dedicated to giving customers with significant and secure top quality products at each customer and services at aggressive price.
ក្រុមហ៊ុនផលិតចិនសម្រាប់ប្រទេសចិន Taq DNA Polymerase និង Qpcr, ក្រុមហ៊ុនរបស់យើងមានកម្លាំងច្រើនក្រៃលែង និងមានប្រព័ន្ធបណ្តាញលក់ប្រកបដោយស្ថិរភាព និងល្អឥតខ្ចោះ។យើងសូមជូនពរឱ្យយើងអាចបង្កើតទំនាក់ទំនងអាជីវកម្មល្អជាមួយអតិថិជនទាំងអស់ពីក្នុងប្រទេស និងក្រៅប្រទេសដោយផ្អែកលើអត្ថប្រយោជន៍ទៅវិញទៅមក។
គោលការណ៍នៃការរចនាបឋម PCR ពេលវេលាពិត
Primer ទៅមុខ និង បញ្ច្រាស primer
សម្រាប់ PCR ពេលវេលាពិត ការរចនាបឋមមានសារៈសំខាន់ណាស់។Primers ត្រូវបានទាក់ទងទៅនឹងភាពជាក់លាក់ និងប្រសិទ្ធភាពនៃការពង្រីក PCR ហើយអាចត្រូវបានរចនាដោយយោងទៅលើគោលការណ៍ដូចខាងក្រោមៈ
- ប្រវែង primer: 18-30bp ។
- មាតិកា GC: 40-60% ។
- តម្លៃ Tm៖ កម្មវិធីរចនាបឋម ដូចជា Primer 5 អាចផ្តល់តម្លៃ Tm នៃ primer ។តម្លៃ Tm នៃ primers ខាងលើ និងខាងក្រោមគួរតែនៅជិតបំផុតតាមដែលអាចធ្វើទៅបាន។រូបមន្តគណនា Tm ក៏អាចប្រើបានដែរ៖ Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T) ។នៅពេលអនុវត្ត PCR សីតុណ្ហភាពក្រោមតម្លៃ primer Tm នៃ 5 ° C ជាទូទៅត្រូវបានជ្រើសរើសជាសីតុណ្ហភាព annealing (ការកើនឡើងដែលត្រូវគ្នានៃសីតុណ្ហភាព annealing អាចបង្កើនភាពជាក់លាក់នៃប្រតិកម្ម PCR) ។
- ថ្នាំ primers និង PCR ផលិតផល៖
- ប្រវែងផលិតផលពង្រីក PCR primer គឺល្អជាង 100-150bp ។
- ការរចនា primers នៅក្នុងតំបន់រចនាសម្ព័ន្ធបន្ទាប់បន្សំនៃគំរូគួរតែត្រូវបានជៀសវាងឱ្យបានច្រើនតាមដែលអាចធ្វើទៅបាន។
- ជៀសវាងការបង្កើតមូលដ្ឋានបំពេញបន្ថែម 2 ឬច្រើនរវាងចុង 3′ នៃ primers ខាងលើ និងខាងក្រោម។
- មូលដ្ឋានស្ថានីយ Primer 3′ មិនអាចមានវត្តមានជាមួយ G ឬ C ជាប់គ្នា 3 បន្ថែមទេ។
- ថ្នាំ primers ខ្លួនឯងមិនអាចមានរចនាសម្ព័ន្ធបំពេញបន្ថែមទេបើមិនដូច្នេះទេរចនាសម្ព័ន្ធសក់នឹងត្រូវបានបង្កើតឡើងដែលប៉ះពាល់ដល់ការពង្រីក PCR ។
- ATCG គួរតែត្រូវបានចែកចាយស្មើៗគ្នាតាមដែលអាចធ្វើទៅបាននៅក្នុងលំដាប់បឋម ហើយមូលដ្ឋានស្ថានីយ 3′ គួរតែត្រូវបានជៀសវាងដូចជា T.
ឧបសម្ព័ន្ធ១៖ គដោយផ្ទាល់RT-qPCR សំណុំសមាសធាតុt កញ្ចប់បន្ថែម
1.Cell Lysis Solution
ដំណោះស្រាយកោសិកាលីស | |||
សមាសធាតុនៃកញ្ចប់ (ប្រព័ន្ធលីលីស ២៤-អណ្តូង) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ធ | 500 ធ | ||
ផ្នែកI | Buffer CL | 20 មីលីលីត្រ | 100 មីលីលីត្រ |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 មីលីលីត្រ × 2 | |
Buffer ST | 1 មីលីលីត្រ × 2 | 10 មីលីលីត្រ | |
ផ្នែកII | ជ័រលុប DNA | 400 μl | 1 មីលីលីត្រ × 2 |
RT លាយ | |
សមាសធាតុនៃកញ្ចប់ (ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម 20 μl) | DRT-01011-B1 |
២០០ ធ | |
5 × ល្បាយ RT ផ្ទាល់ | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7ml × 2 |
qPCR លាយ | ||
សមាសធាតុនៃកញ្ចប់ (ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
២០០ ធ | 1000 ធ | |
2 × ផ្ទាល់ qPCR Mix-Taqman | 1 មីលីលីត្រ × 2 | 1.7ml × 6 |
20 × ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 មីលីលីត្រ | 10 មីលីលីត្រ |
សៀវភៅណែនាំ៖