FAQ សម្រាប់ឧបករណ៍ញែក RNA សរុបរបស់សត្វ

ការវិភាគខាងក្រោមនៃបញ្ហាដែលអ្នកអាចជួបប្រទះនៅក្នុងការទាញយកជាលិកាសត្វ / កោសិកា RNA will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

RNA មិន​ត្រូវ​បាន​ស្រង់​ចេញ ឬ​ទិន្នផល RNA មាន​កម្រិត​ទាប

ជារឿយៗមានកត្តាជាច្រើនដែលជះឥទ្ធិពលដល់ប្រសិទ្ធភាពនៃការស្តារឡើងវិញ ដូចជា៖ ខ្លឹមសារនៃ RNA គំរូជាលិកា វិធីសាស្រ្តនៃប្រតិបត្តិការ បរិមាណ elution ជាដើម។

1. ការ​ងូត​ទឹក​ទឹកកក​ឬ​ការ​ចាប់​ផ្ចិត​ cryogenic (4°C) ត្រូវ​បាន​ធ្វើ​ឡើង​កំឡុង​ពេល​ប្រតិបត្តិការ។

អនុសាសន៍: ដំណើរការនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (15-25 ° C) ពេញមួយដំណើរការទាំងមូល កុំងូតទឹកទឹកកក និង centrifuge នៅសីតុណ្ហភាពទាប។

2. ការរក្សាទុកគំរូមិនត្រឹមត្រូវ ឬពេលវេលាផ្ទុកសំណាកច្រើនពេក។

អនុសាសន៍៖ ទុកសំណាកនៅសីតុណ្ហភាព -80 °C ឬបង្កកក្នុងអាសូតរាវ និងជៀសវាងការប្រើទឹកកកម្តងហើយម្តងទៀត។ព្យាយាមប្រើជាលិកាស្រស់ ឬកោសិកាវប្បធម៌សម្រាប់ការទាញយក RNA ។

3. លីលីសគំរូមិនគ្រប់គ្រាន់។

អនុសាសន៍៖ នៅពេលធ្វើជាលិកាដូចគ្នា ត្រូវប្រាកដថាជាលិកាមានភាពដូចគ្នាគ្រប់គ្រាន់ ហើយកោសិកាជាលិកាត្រូវបានបំបែកគ្រប់គ្រាន់ ដើម្បីពន្យល់ពីការបញ្ចេញ RNA ។

4. ភាពវៃឆ្លាតមិនត្រូវបានបន្ថែមត្រឹមត្រូវទេ។

អនុសាសន៍៖ បញ្ជាក់ថា RNase-Free ddH₂O ត្រូវបានបន្ថែមទម្លាក់តាមទិសទៅកណ្តាលនៃភ្នាសជួរឈរបន្សុត។

5. បរិមាណត្រឹមត្រូវនៃអេតាណុលដាច់ខាតមិនត្រូវបានបន្ថែមទៅ Buffer RL2 ឬ Buffer RW2 ទេ។

អនុសាសន៍៖ អនុវត្តតាមការណែនាំ បន្ថែមបរិមាណត្រឹមត្រូវនៃអេតាណុលដាច់ខាតទៅ Buffer RL2 និង Buffer RW2 ហើយលាយឱ្យបានល្អមុនពេលប្រើឧបករណ៍។

6. កំរិតប្រើសំណាកជាលិកាគឺមិនសមស្របទេ។

ការណែនាំ៖ ប្រើជាលិកា ១០-២០ មីលីក្រាម ឬ (១-៥) × ១០⁶កោសិកាក្នុងមួយសតិបណ្ដោះអាសន្ន 500 μl RL1 ដោយសារការប្រើប្រាស់ជាលិកាច្រើនពេកអាចបណ្តាលឱ្យកាត់បន្ថយការទាញយក RNA ។

7. បរិមាណ elution មិនត្រឹមត្រូវ ឬ elution មិនពេញលេញ។

អនុសាសន៍: បរិមាណ elution នៃជួរឈរបន្សុតគឺ 50-200 μl;ប្រសិនបើឥទ្ធិពល elution មិនពេញចិត្ត វាត្រូវបានណែនាំអោយពន្យារម៉ោងដាក់សីតុណ្ហភាពក្នុងបន្ទប់ បន្ទាប់ពីបន្ថែម RNase-Free ddH ដែលត្រូវបានកំដៅជាមុន₂O, ឧទាហរណ៍សម្រាប់ 5-10 នាទី។

8. ជួរឈរបន្សុតមានសំណល់អេតាណុលបន្ទាប់ពីការលាងសម្អាត Buffer RW2 ។

ការណែនាំ៖ ប្រសិនបើមានសំណល់អេតាណុលបន្ទាប់ពីការលាងសម្អាត Buffer RW2 ការផ្ចិតបំពង់ទទេរយៈពេល 1 នាទី ពេលវេលាសម្រាប់ប្រតិបត្តិការ centrifugation បំពង់ទទេអាចកើនឡើងដល់ 2 នាទី ឬជួរឈរបន្សុតអាចដាក់នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់រយៈពេល 5 នាទី ដើម្បីដកអេតាណុលដែលនៅសល់ចេញបានគ្រប់គ្រាន់។

RNA បន្សុតត្រូវបានបំផ្លាញ

គុណភាពនៃ RNA បន្សុតគឺទាក់ទងទៅនឹងកត្តាដូចជាការរក្សាសំណាក ការចម្លងរោគ RNase និងឧបាយកលជាដើម។

1. សំណាកជាលិកាមិនត្រូវបានរក្សាទុកទាន់ពេលទេ។

អនុសាសន៍៖ ប្រសិនបើសំណាកជាលិកា ឬកោសិកាមិនត្រូវបានប្រើក្នុងលក្ខណៈទាន់ពេលវេលាបន្ទាប់ពីការប្រមូល រក្សាទុកភ្លាមៗនៅសីតុណ្ហភាព -80 °C ឬអាសូតរាវ។ដើម្បីទាញយក RNA សូមប្រើជាលិកា ឬគំរូកោសិកាដែលទើបនឹងយកនៅពេលណាដែលអាចធ្វើទៅបាន។

2. ការកកម្តងហើយម្តងទៀតនៃសំណាកជាលិកា។

អនុសាសន៍៖ នៅពេលរក្សាទុកសំណាកជាលិកា យកល្អគួរតែកាត់វាជាបំណែកតូចៗសម្រាប់ការរក្សាទុក ហើយយកបំណែកមួយចេញនៅពេលប្រើប្រាស់ ដើម្បីជៀសវាងការកកសំណាកម្តងទៀត និងការរិចរិលនៃ RNA ។

3. RNase ត្រូវបានណែនាំ ឬមិនពាក់ស្រោមដៃ របាំងមុខ។ល។ ក្នុងអំឡុងពេលប្រតិបត្តិការ។

អនុសាសន៍៖ ការពិសោធន៍ទាញយក RNA ត្រូវបានអនុវត្តយ៉ាងល្អបំផុតនៅក្នុងបន្ទប់រៀបចំ RNA ដាច់ដោយឡែក ហើយតារាងត្រូវបានសម្អាតមុនពេលពិសោធន៍។

ពាក់ស្រោមដៃ និងរបាំងដែលអាចចោលបានក្នុងអំឡុងពេលពិសោធន៍ ដើម្បីកាត់បន្ថយការរិចរិល RNA ដែលបណ្តាលមកពីការណែនាំនៃ RNase ។

4. សារធាតុ Reagents ត្រូវបានបំពុលដោយ RNase កំឡុងពេលប្រើប្រាស់។

ការណែនាំ៖ ជំនួសដោយឧបករណ៍ញែក RNA សរុបសត្វថ្មីសម្រាប់ការពិសោធន៍ពាក់ព័ន្ធ។

5. បំពង់ centrifuge, គន្លឹះ, ល. ដែលប្រើក្នុងការរៀបចំ RNA ត្រូវបានបំពុលដោយ RNase ។

អនុសាសន៍៖ បញ្ជាក់ថា បំពង់ centrifuge, គន្លឹះ, pipettes ជាដើម ដែលប្រើក្នុងការទាញយក RNA គឺសុទ្ធតែជា RNase-Free។

RNA ដែលទទួលបានបន្សុតប៉ះពាល់ដល់ការពិសោធន៍ខាងក្រោម

RNA បន្សុតដោយជួរឈរបន្សុត ប្រសិនបើអ៊ីយ៉ុងអំបិល មាតិកាប្រូតេអ៊ីនធំពេកនឹងប៉ះពាល់ដល់ការពិសោធន៍ខាងក្រោមដូចជា៖ ការចម្លងបញ្ច្រាស Northern Blot et al ។

1. RNA ដែលត្រូវបានដកចេញមានសំណល់អ៊ីយ៉ុងអំបិល។

អនុសាសន៍៖ បញ្ជាក់ថាបរិមាណអេតាណុលត្រឹមត្រូវត្រូវបានបន្ថែមទៅ Buffer RW2 និងធ្វើការលាងសម្អាតជួរឈរបន្សុតចំនួន 2 នៅល្បឿន centrifugal ដែលបានបញ្ជាក់សម្រាប់ប្រតិបត្តិការ។ប្រសិនបើមានសំណល់អ៊ីយ៉ុងអំបិល សូមទុកជួរឈរបន្សុតទៅ Buffer RW2 រយៈពេល 5 នាទីនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ហើយធ្វើ centrifugation ដើម្បីបង្កើនការយកចេញនូវភាពកខ្វក់នៃអំបិល។

2. សំណល់អេតាណុលនៅក្នុង elutioned RNA ។

អនុសាសន៍៖ បញ្ជាក់ថាបន្ទាប់ពីការលាងសតិបណ្ដោះអាសន្ន RW2 ធ្វើប្រតិបត្តិការ centrifugation បំពង់ទទេក្នុងល្បឿន centrifugation ដែលបានចង្អុលបង្ហាញសម្រាប់ប្រតិបត្តិការ បង្កើនពេលវេលានៃប្រតិបត្តិការ centrifugation បំពង់ទទេដល់ 2 នាទី ប្រសិនបើនៅមានសំណល់អេតាណុល ឬទុកវានៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់រយៈពេល 5 នាទី បន្ទាប់ពីបំពង់ទទេ ដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាពនៃ reximethan reximethan ។

ភាពឯកោនៃប្រភេទគំរូអាស៊ីត nulceic

ឧបករណ៍ញែក RNA របស់ Foregene អាចទទួលបាន ឯកោ RNA សរុប/ស្រង់ចេញពីប្រភពគំរូខាងក្រោម៖ ជាលិកាសត្វ រុក្ខជាតិ កោសិកា មេរោគ ឈាម។ល។

តើខ្ញុំរក្សាទុកកញ្ចប់ដោយរបៀបណា

ការផ្ទុកសីតុណ្ហភាពក្នុងបន្ទប់រយៈពេល 24 ខែ។