វិធីសាស្រ្ត PCR និងការចម្លងរោគ aerosol អាស៊ីត nucleic នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ធ្វើតេស្តអាស៊ីត nucleic គឺដូចជាផ្នែកទាំងពីរនៃកាក់មួយ។យើងអាចជ្រើសរើសបាន ឬអត់ ប៉ុន្តែយើងមិនអាចជ្រើសរើសថាតើយើងចង់បាន ឬចំណាយវានោះទេ។

1. ការពិនិត្យឧបករណ៍ដក DNA

ដើម្បីសម្រេចបាននូវការដកយកចេញនូវចន្លោះនៃការចម្លងរោគ aerosol នៃអាស៊ីត nucleic នោះដំបូងឡើយ ចាំបាច់ត្រូវពិនិត្យឧបករណ៍ដក DNA ដែលអាចយកចេញនូវអាស៊ីត nucleic ក្នុងសភាពរាវ។ដោយសារតែមិនមានឧបករណ៍ដក DNA ច្រើនទេដែលពិតជាមានប្រសិទ្ធភាព។សម្រាប់វិធីសាស្រ្តពិសោធន៍ សូមយោងទៅលើ៖ ឧបករណ៍ដក DNA មិនអាចជា “ជ្រុងសម្ងាត់” នៃមន្ទីរពិសោធន៍បានទេ!

នៅក្នុងការពិសោធន៍នេះ 100 ច្បាប់ចម្លង/μL (CT ប្រហែល 31) នៃ ASFV plasmid និង DNA remover ដែលកំណត់ដោយ digital PCR ត្រូវបានលាយបញ្ចូលគ្នាក្នុងបរិមាណស្មើគ្នា ហើយបន្ទាប់មកមានប្រតិកម្មនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់រយៈពេល 10 នាទី 20 នាទី និង 30 នាទីរៀងគ្នា។បន្ទាប់ពីការស្រង់ចេញអាស៊ីត nucleic ការពង្រីក qPCR ត្រូវបានអនុវត្ត។ការត្រួតពិនិត្យជាវិជ្ជមានលាយជាមួយប្លាស្មា និងទឹកត្រូវបានប្រៀបធៀប។ដោយសារការពិសោធន៍មិនត្រូវបានបញ្ចប់ក្នុងពេលតែមួយ វាអាចមានគម្លាតជាក់លាក់រវាងលទ្ធផល ប៉ុន្តែវាមិនប៉ះពាល់ដល់ការសន្និដ្ឋាននៃការពិសោធន៍នោះទេ។រហូតមកដល់ពេលនេះ ខ្ញុំបានវាយតម្លៃផលិតផលបំបាត់ DNA ពាណិជ្ជកម្មចំនួន 10 ។មានតែផលិតផលលេខ 1 លេខ 6 និងលេខ 8 ប៉ុណ្ណោះដែលអាចបំផ្លាញ DNA ប្លាស្មាមីតក្នុងស្ថានភាពរាវបានយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព។ផលិតផលផ្សេងទៀតស្ទើរតែគ្មានប្រសិទ្ធភាព។

តារាងទី 1 ឥទ្ធិពលនៃការដកយកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកនៃសារធាតុបំបាត់ DNA ដែលមានលក់ក្នុងពាណិជ្ជកម្ម

2. ការពិសោធន៍ប្រសិទ្ធភាពនៃការដក DNA នៃសារធាតុសម្លាប់មេរោគដែលប្រើជាទូទៅ

1. ពិនិត្យថ្នាំសំលាប់មេរោគដែលប្រើជាទូទៅ

មានថ្នាំសំលាប់មេរោគជាច្រើនប្រភេទដែលប្រើជាទូទៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍៖ អាល់ឌីអ៊ីត ហ្វីណុល អាល់កុល អំបិលអាម៉ូញ៉ូម quaternary peroxides ការត្រៀមក្លរីន និងអាស៊ីត និងមូលដ្ឋាន។ឥទ្ធិពល​នៃ​ការ​សម្លាប់​មេរោគ​នៃ​សារធាតុ​សម្លាប់​មេរោគ​ទាំង​នេះ​លើ​អតិសុខុមប្រាណ​ត្រូវ​បាន​ធ្វើ​ការ​ផ្ទៀងផ្ទាត់​យ៉ាង​ពេញលេញ​ដោយ​ការ​ពិសោធន៍ ប៉ុន្តែ​មិន​មាន​ទិន្នន័យ​ពិសោធន៍​គ្រប់គ្រាន់​អំពី​ឥទ្ធិពល​រិចរិល​នៃ​អាស៊ីត​នុយក្លេ​អ៊ីក​ទេ។មន្ទីរពិសោធន៍ធ្វើតេស្តអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកត្រូវការថ្នាំសម្លាប់មេរោគដែលមិនត្រឹមតែមានឥទ្ធិពលសម្លាប់មេរោគល្អលើអតិសុខុមប្រាណប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែក៏អាចបំផ្លាញ DNA ផងដែរ។លទ្ធផលនៃការធ្វើតេស្តបង្ហាញថាមានតែការត្រៀមលក្ខណៈក្លរីនចំនួន 84 នៃសារធាតុសម្លាប់មេរោគ និងអាស៊ីត trichloroisocyanuric និង 1 M ទឹកអាស៊ីត hydrochloric ដែលបំពេញតាមតម្រូវការ។ដោយសារអាស៊ីត hydrochloric 1 M មានភាពច្រេះខ្លាំង វាត្រូវបានណែនាំថាការត្រៀមលក្ខណៈក្លរីនត្រូវបានប្រើជាកាកសំណល់នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍សាកល្បងអាស៊ីត nucleic ។ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការត្រៀមលក្ខណៈក្លរីនគឺអាចបំផ្លាញលោហធាតុ ហើយមិនអាចប្រើសម្រាប់ការសម្លាប់មេរោគឧបករណ៍ និងឧបករណ៍បានទេ។

តារាងទី 2 ផលប៉ះពាល់នៃការដក DNA នៃប្រភេទផ្សេងគ្នានៃសារធាតុសម្លាប់មេរោគ

2. កំហាប់ប្រសិទ្ធភាពអប្បបរមានៃការត្រៀមលក្ខណៈក្លរីន

សារធាតុសម្លាប់មេរោគដែលមានមូលដ្ឋានលើក្លរីន មានឥទ្ធិពលបំផ្លាញ DNA ខ្លាំង ប៉ុន្តែដោយសារភាពច្រេះ និងការរលាកនៃលោហធាតុ ពួកវាអាចប្រើសម្រាប់សម្អាតកម្រាលឥដ្ឋ តុបញ្ជរដែលមិនមែនជាលោហធាតុ គន្លឹះសម្រាប់ត្រាំ បំពង់ centrifuge និងវត្ថុធ្វើតេស្តផ្សេងទៀត។

យោងតាម ​​"គោលការណ៍ណែនាំបច្ចេកទេសនៃការសម្លាប់មេរោគក្នុងសួតថ្មីនៃជំងឺរលាកសួត"៖ សារធាតុពុល (ឈាមរបស់អ្នកជំងឺ ទឹករំអិល និងក្អួត) ដែលមានក្លរីន 5g/L-10g/L ថ្នាំសំលាប់មេរោគដែលមានផ្ទុកក្លរីន។ជាន់ ជញ្ជាំង និងផ្ទៃវត្ថុប្រើប្រាស់ ក្លរីន 1g/L ក្លរីនសម្លាប់មេរោគ៖ សម្លៀកបំពាក់ ពូក និងវាយនភណ្ឌផ្សេងទៀតត្រូវត្រាំក្នុងទឹកថ្នាំសម្លាប់មេរោគក្លរីន 0.5g/L សម្រាប់រយៈពេល 30 នាទី ហើយបន្ទាប់មកសម្អាតជាធម្មតា។

តារាងទី 3 ឥទ្ធិពលដក DNA នៃកំហាប់ផ្សេងគ្នានៃសារធាតុសម្លាប់មេរោគក្លរីន

លទ្ធផលតេស្តបង្ហាញថា៖ នៅពេលដែលកំហាប់ក្លរីនមានប្រសិទ្ធភាពធំជាង ឬស្មើនឹង 1.2 g/L ថ្នាំសំលាប់មេរោគដែលមានសារធាតុក្លរីនអាចបង្ខូចទាំងស្រុង 100 ច្បាប់ចម្លង/μL plasmid នៅពេលវាប្រើរយៈពេល 5 នាទី។នៅពេលធ្វើសកម្មភាពរយៈពេល 10 នាទី ថ្នាំសម្លាប់មេរោគចំនួន 84 ដែលមានកំហាប់ក្លរីនមានប្រសិទ្ធភាពលើសពី ឬស្មើនឹង 0.6 ក្រាម/L អាចបំផ្លាញ 100 ច្បាប់ចម្លង/μL នៃប្លាស្មាទាំងស្រុង។

3. ការពិសោធន៍ដកខ្យល់ដែលបំពុលដោយអាស៊ីត nucleic aerosol

តើធ្វើដូចម្តេចដើម្បីសម្អាតខ្យល់ដែលបំពុលដោយ aerosols អាស៊ីត nucleic?គំនិតភាគច្រើនគឺបង្កើតបរិយាកាសដែលបំពុលដោយ aerosol ហើយបន្ទាប់មកសម្អាតវា ឬសម្អាតអាស៊ីត nucleic បន្ទាប់ពីការចម្លងរោគ។សម្រាប់ខ្ញុំ ការពិសោធន៍ដែលមិនអាចធ្វើម្តងទៀតបាន ហើយលទ្ធផលនៃការពិសោធន៍មិនអាចវិភាគជាបរិមាណគឺគ្មានន័យទេ ដូច្នេះខ្ញុំបានខ្ចីវិធីសាស្រ្តមួយចំនួននៃការសម្លាប់មេរោគតាមខ្យល់។សូមមើល "តម្រូវការទូទៅ GB27948-2020 សម្រាប់ថ្នាំសំលាប់មេរោគតាមខ្យល់" និង "លក្ខណៈបច្ចេកទេសនៃការសម្លាប់មេរោគ"

1. សម្ភារៈសាកល្បង

1.1 ឧបករណ៍ដក DNA៖ នៅក្នុងការពិសោធន៍នេះ ឧបករណ៍ដក DNA 6 និង 8 ដែលមានលក់ក្នុងតារាងទី 1 ត្រូវបានជ្រើសរើស។

1.2 ការធ្វើតេស្ត plasmid៖ ដោយពិចារណាថាតម្លៃ CT នៃការបំពុលក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ភាគច្រើននឹងខ្ពស់ជាង 30 កំហាប់នៃហ្សែន ASFV plasmid ដែលប្រើនៅពេលនេះគឺប្រហែល 100 ច្បាប់ចម្លង/μL ហើយបរិមាណ fluorescent PCR CT គឺប្រហែល 31.07 ។បន្ថែម plasmid ទៅ swab កប្បាស និងខ្យល់ស្ងួត។

1.3 ឧបករណ៍ធ្វើតេស្ត៖ ឧបករណ៍សម្លាប់មេរោគ Bilingkehan KVBOX ដែលត្រូវបានគាំទ្រដោយក្រុមហ៊ុន Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd. មានសមត្ថភាពកំចាត់មេរោគក្នុងខ្យល់បានយ៉ាងល្អជាមួយនឹងថ្នាំសំលាប់មេរោគអ៊ីដ្រូសែន peroxide ហើយអាចសម្លាប់មេរោគ និងអតិសុខុមប្រាណដទៃទៀតយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព។

1.4 កន្លែងសាកល្បង៖ បង្អួចផ្ទេរបិទជិតប្រហែល 0.1 ម៉ែត្រគូប។

2. វិធីសាស្រ្តសាកល្បង

បរិមាណថ្នាំសំលាប់មេរោគដែលបានកំណត់នៅលើម៉ាស៊ីនសម្លាប់មេរោគគឺ 10ml ហើយកំហាប់គឺ 100ml/m3 ដែលខ្ពស់ជាង "តម្រូវការទូទៅ GB27948-2020 សម្រាប់ថ្នាំសំលាប់មេរោគតាមខ្យល់"៖ នៅពេលប្រើបាញ់ថ្នាំសំលាប់មេរោគ បរិមាណថ្នាំសំលាប់មេរោគគួរតែមាន ≤10ml/m3