ការធ្វើតេស្តមន្ទីរពិសោធន៍ចាប់ផ្តើមជាមួយនឹងការប្រមូលគំរូ ហើយការប្រមូលសំណាកគឺងាយស្រួលបំផុតក្នុងការមើលរំលង។អ្វីដែលសំខាន់បំផុតសម្រាប់ការប្រមូលគំរូគឺជ្រើសរើសប្រភេទគំរូត្រឹមត្រូវ ប្រើប្រាស់ឧបករណ៍សំណាកសមស្រប និងអនុវត្តការដឹកជញ្ជូន និងដំណើរការសមហេតុផល។

I. ប្រភេទគំរូ

ប្រភេទគំរូទូទៅមានដូចខាងក្រោម៖

វិធីសាស្រ្តគំរូអាចយោងទៅលើលក្ខណៈបច្ចេកទេសសម្រាប់ការត្រួតពិនិត្យបរិស្ថាននៃមេរោគឆ្លងថ្មីនៅក្នុងទីផ្សារពាណិជ្ជកម្មកសិកម្ម (បាហ្សា)”៖

1. Swab សំណាកពីបំពង់ក ដៃ សម្លៀកបំពាក់ និងវត្ថុផ្សេងទៀតរបស់អ្នកអនុវត្ត៖ វាត្រូវបានទាមទារឱ្យប្រើដំណោះស្រាយការពារមេរោគនៅក្នុងបំពង់សំណាកមេរោគ ហើយជ្រៀតចូលយ៉ាងពេញលេញនូវសំឡីសំឡី។ផ្ទៃនៃដី) ត្រូវបានអនុវត្តម្តងហើយម្តងទៀតនិងលាងជមែះលើសពី 3 ដង។ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ ចាំបាច់ត្រូវអនុវត្តគំរូចែកចាយពហុចំណុចលើផ្ទៃវត្ថុដែលបានយកគំរូ។

2. សំណាកសំណាកអាហារលើផ្ទៃ៖ សំណាកអាហារមិនអាចប្រមូលដោយផ្ទាល់បានទេ។អាហារដែលត្រូវប្រមូលគួរត្រូវបានបំបែកដោយប្រុងប្រយ័ត្ន ហើយរក្សាទុកក្នុងថង់សំណាកស្អាត មុនពេលប្រមូលសំណាក swab ។វាត្រូវបានតម្រូវឱ្យប្រើដំណោះស្រាយការពារមេរោគនៅក្នុងបំពង់សំណាកមេរោគ បន្ទាប់ពីត្រាំសំឡីសំឡីឱ្យបានពេញលេញ ដើម្បីលាបថ្នាំម្តងហើយម្តងទៀត ហើយលាងជម្រះផ្ទៃនៃគំរូអាហារដែលត្រូវប្រមូលលើសពី 3 ដង។ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះវាចាំបាច់ដើម្បីអនុវត្តគំរូចែកចាយពហុចំណុចនៅលើផ្ទៃគំរូ។

3. សំណាកទឹកសំអុយ៖ យោងតាមការចែកចាយប្រព័ន្ធលូក្នុងទីផ្សារ សូមជ្រើសរើសទីតាំងសំណាកទឹកស្អុយចំនួន 2-3 ទីតាំង ដោយផ្តោតលើការប្រមូលបណ្តាញបំពង់ខាងក្នុង ផ្លូវចុះក្រោមនៃទិសដៅលំហូរទឹក ឬការតភ្ជាប់ជាមួយបណ្តាញបំពង់ក្រុង។ដើម្បី​ប្រមូល​សំណាក​សំណាក សូម​ជ្រមុជ​វា​ទៅក្នុង​ទឹកស្អុយ​ជាមួយ​សំឡី​សំឡី​សំណាក ដើម្បី​ឱ្យ​វា​ស្រូប​ទឹកស្អុយ ហើយ​លាង​វា​ក្នុង​បំពង់​សំណាក​ឱ្យបាន​ច្រើនជាង 3 ដង។ដើម្បីប្រមូលសំណាកទឹកសំអុយ ប្រើដបជ័រជ័រ ដើម្បីប្រមូលសំណាកទឹកស្អុយ 30-500 mL;សម្រាប់ការប្រមូលទឹកស្អុយដែលមានបរិមាណលើសពី 500 មីល្លីលីត្រ ធុងជ័រជ័រ ឬឧបករណ៍ចម្រាញ់ពិសេសទឹកសំណាកនៅនឹងកន្លែងអាចប្រើបាន។ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ ចាំបាច់ត្រូវធ្វើគំរូចែកចាយពហុចំណុចសម្រាប់ទីតាំងសំណាកលូ។

4. សំណាកសត្វ៖ សម្រាប់សត្វមានជីវិត គំរូសំណាកអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីប្រមូលផ្ដុំផ្ទៃរាងកាយ ថង់ទឹកមាត់ និងរន្ធគូថ ហើយសំណាកលាមក ឬសំងាត់ក៏អាចត្រូវបានគេប្រមូល និងកត់ត្រាតាមសន្លឹកកំណត់ត្រាផងដែរ។សម្រាប់សំណាកសត្វដែលបានទទួលការកាត់ស្បែក។វាត្រូវបានតម្រូវឱ្យប្រើដំណោះស្រាយការពារមេរោគនៅក្នុងបំពង់គំរូមេរោគ ដើម្បីជ្រៀតចូលយ៉ាងពេញលេញនូវសំឡីសំឡី ហើយបន្ទាប់មកអនុវត្តឡើងវិញនូវផ្ទៃនៃគំរូអាហារដែលត្រូវប្រមូល។Shabu ច្រើនជាង 3 ដង។ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះវាចាំបាច់ដើម្បីអនុវត្តគំរូចែកចាយពហុចំណុចនៅលើផ្ទៃគំរូ។

5. ឧបករណ៍ប្រើប្រាស់ផ្សេងៗ៖ ធុងសម្រាប់ដឹកជញ្ជូន និងបង្កាត់ពូជសត្វ ដូចជាទ្រុង ឬអាងចិញ្ចឹមត្រី។ជាដំបូង សង្កេត ឬស្វែងយល់អំពីប្រភេទសត្វជាក់លាក់ដែលត្រូវបានរក្សាទុក និងបង្កាត់នៅក្នុងធុង ហើយប្រមូលសំណាក swab នៅលើជញ្ជាំងខាងក្នុងនៃធុង ឬសំណាករាវនៃមាតិកា។

6. ប្រមូលសំណាក aerosol នៅក្នុងតំបន់ដែលមនុស្សប្រមូលផ្តុំ តំបន់ពាណិជ្ជកម្មក្នុងតំបន់ ការិយាល័យ និងបន្ទប់សម្រាក។

II. ឧបករណ៍គំរូ
1. បំពង់ប្រមូលឈាម
ប្រសិនបើអ្នកត្រូវធ្វើការធ្វើតេស្តអាស៊ីត nucleic និងសំណាក anticoagulant នៅពេលក្រោយ វាត្រូវបានណែនាំឱ្យប្រើសរសៃឈាមខ្វះចន្លោះដែលមាន EDTA anticoagulant ដើម្បីប្រមូលឈាម។សម្រាប់សំណាកសេរ៉ូម វាត្រូវបានណែនាំអោយប្រើសរសៃឈាមបូមធូលី ដោយគ្មានថ្នាំប្រឆាំងនឹងកំណកឈាម។

2. គំរូ swab

វាត្រូវបានផ្ដល់អនុសាសន៍ឱ្យប្រើថង់ប៉ូលីភីលីនលីនជំនួសឱ្យការស្អំកាល់ស្យូម alginate ឬ swab ជាមួយបង្គោលឈើ ព្រោះវាអាចមានសារធាតុដែលធ្វើឱ្យមេរោគមួយចំនួនអសកម្ម និងរារាំងការធ្វើតេស្ត PCR ។Swabs ជាមួយក្បាលកប្បាសមិនអាចប្រើបានទេ ពីព្រោះសរសៃកប្បាសមានការស្រូបយកប្រូតេអ៊ីនខ្លាំង ហើយមិនងាយនឹងរលាយចូលទៅក្នុងដំណោះស្រាយអភិរក្សជាបន្តបន្ទាប់នោះទេ។

នៅក្នុង "លក្ខណៈបច្ចេកទេសសម្រាប់ការប្រមូលចម្រុះ 10-in-1 និងការរកឃើញអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកថ្មី Coronavirus" វាត្រូវបានចែងយ៉ាងច្បាស់ថា "ថង់សំណាកគួរតែធ្វើពី polyester, nylon និងសមា្ភារៈមិនមែនកប្បាស និងមិនមែនកាល់ស្យូមផ្សេងទៀត ហើយចំណុចទាញគួរតែធ្វើពីវត្ថុធាតុដើមដែលមិនមែនជាឈើ។ចំណុចបំបែកគឺប្រហែល 3cm ពីផ្នែកខាងលើនៃក្បាល swab ដែលងាយស្រួលបំបែក។

CDC នៅសហរដ្ឋអាមេរិកក៏បានលើកឡើងផងដែរថា "ប្រើតែសរសៃសំយោគជាមួយនឹងផ្លាស្ទិច ឬខ្សែលួស។កុំប្រើកាល់ស្យូម alginate swabs orwabs ជាមួយ shafts ឈើ,ដោយសារពួកវាអាចមានសារធាតុដែលធ្វើឱ្យមេរោគមួយចំនួនអសកម្ម និងរារាំងការធ្វើតេស្ត PCR ។

បច្ចុប្បន្ននេះត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយគឺ កន្សែងនីឡុងមាប់មគដែលអាចបោះចោលបាន រួមបញ្ចូលគ្នាជាមួយដំបងផ្លាស្ទិច។ដង្កូវហ្វូងមានអត្រាស្រូបយកទឹក និងការបញ្ចេញទឹកបានល្អជាង។យោងតាមកន្លែងសំណាកផ្សេងៗគ្នា ក្បាល swab ក៏មានទំហំ និងសរសៃខុសៗគ្នាដែរ។កម្រាស់។”

3. ដំណោះស្រាយថែរក្សាការដឹកជញ្ជូនគំរូ

ដំណោះស្រាយការរក្សាភាពអសកម្មនៃមេរោគ៖ បរិមាណដ៏សមស្របនៃកំហាប់អំបិល guanidine និងសមាសធាតុលីហ្សីហ្សីរបស់មេរោគជាច្រើនប្រភេទអាច lyse មេរោគដោយផ្ទាល់ដើម្បីបញ្ចេញអាស៊ីត nucleic, អសកម្ម RNase និង DNase និងធានានូវភាពសុចរិតនៃអាស៊ីត nucleic ដែលអាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការរកឃើញ qPCR ជាបន្តបន្ទាប់។វាមិនអាចប្រើសម្រាប់ការដាំដុះមេរោគ និងការដាក់ឱ្យនៅដាច់ដោយឡែកបានទេ។

ដំណោះស្រាយដឹកជញ្ជូន និងការពារមេរោគ៖ មានផ្ទុកនូវអំបិល អាស៊ីតអាមីណូ វីតាមីន គ្លុយកូស និងប្រូតេអ៊ីនដែលត្រូវការសម្រាប់ការរស់រានរបស់មេរោគ ដែលអាចរក្សាសកម្មភាពរបស់មេរោគ។វាអាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការទាញយកអាស៊ីត nucleic និងការរកឃើញមេរោគនាពេលអនាគត ហើយវាក៏អាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការដាំដុះ និងការបំបែកមេរោគផងដែរ។

4. បំពង់រក្សាទុកគំរូ និងថង់គំរូ

បំពង់ផ្ទុកគំរូគួរតែជាបំពង់ផ្លាស្ទិចមាប់មគដែលមានមួកវីសដែលមិនស្រូបយកអាស៊ីត nucleic ។បំពង់គំរូនីមួយៗគួរតែត្រូវបានគ្របដោយថង់គំរូដើម្បីការពារការលេចធ្លាយ និងការចម្លងរោគនៃគំរូ។

III.សារធាតុរំខាននៅក្នុងគំរូ

សារធាតុជ្រៀតជ្រែកក្នុងការពិសោធន៍ PCR

1. ការជ្រៀតជ្រែក endogenous

សារធាតុដែលមាននៅក្នុងគំរូរាងកាយអាចរំខានដល់ការរកឃើញសារធាតុផ្សេងទៀត។

ឈាម៖heme (> 1mg/ml), hemin (>0.1ng/μl), triglycerides, IgG ជាដើម។

ទឹកនោម៖អ៊ុយ (20 មីលីម៉ែត្រ);

លាមក៖polysaccharides រុក្ខជាតិ, cholate;

ជាលិកា៖ប្រូតេអ៊ីន, កូឡាជែន;

ទឹកដោះគោ: protease, អ៊ីយ៉ុងកាល់ស្យូម;

គ្រឿងញៀន: ថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិច ថ្នាំប្រឆាំងវីរុស អ័រម៉ូន ។ល។

ផ្សេងទៀត។

2. ការជ្រៀតជ្រែក exogenous

វាមកពីសារធាតុដែលអាចរំខានដល់ការរកឃើញសារធាតុផ្សេងទៀតនៅក្នុង vitro ។សារធាតុបន្ថែមគំរូ និងសារធាតុដែលអាចទាក់ទងបានក្នុងអំឡុងពេលប្រមូល និងដំណើរការគំរូ៖

ការផ្គត់ផ្គង់សាកល្បង: ជែលបំបែកសេរ៉ូម ធុងប្រមូលសំណាក និងប្រដាប់បិទកៅស៊ូ បំពង់បូម សារធាតុរាវបង្ហូរបំពង់បូម ម្សៅស្រោមដៃ ល។

ថ្នាំប្រឆាំងនឹងការកកឈាម: heparin (> 0.1 U/mL), EDTA (> 0.5 mM) ។ល។

សារធាតុរំលាយសរីរាង្គ: isopropanol (> 0.1 IU/ml), betaine, dimethyl sulfoxide, formamide, glycerin, PEG ជាដើម។

ថ្នាំសំលាប់មេរោគ: ជាតិអាល់កុល (អេតាណុល> 1%), អាល់ឌីអ៊ីត, ហ្វីណុល (phenol> 0.2%), សារធាតុ peroxides, អាស៊ីតខ្លាំង (HCL), អាល់កាឡាំងខ្លាំង (NaOH) ។ល។

សាប៊ូបោកខោអាវ៖SDS (> 0.005%);

ដី៖ Humus

ថ្នាំជ្រលក់៖ Indigo

ផ្សេងទៀត។

នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌនៃគំរូខាងក្រៅជាក់ស្តែង ដូចជាការប្រមូលសំណាកបរិស្ថាន គំរូអាចមានសារធាតុជ្រៀតជ្រែកជាច្រើន ហើយសមាសធាតុនៃសារធាតុជ្រៀតជ្រែកក្នុងទីតាំងនីមួយៗគឺខុសគ្នា ដែលទាមទារឱ្យមានការពិសោធន៍ជ្រៀតជ្រែក PCR ទៅតាមលក្ខខណ្ឌក្នុងតំបន់។

IV.លក្ខខណ្ឌផ្ទុក និងការដឹកជញ្ជូនគំរូ

សំណាកគ្លីនិកដែលប្រមូលបានថ្មីៗគួរតែត្រូវបានបញ្ជូនទៅមន្ទីរពិសោធន៍ក្នុងរយៈពេលពី 2 ទៅ 4 ម៉ោងបន្ទាប់ពីការប្រមូលនៅសីតុណ្ហភាព 2°C ដល់ 8°C។រក្សាទុកនៅ 4 ℃ក្នុងរយៈពេល 24 ម៉ោង។សំណាកដែលប្រើសម្រាប់ការញែកមេរោគ និងការរកឃើញអាស៊ីត nucleic គួរតែត្រូវបានធ្វើតេស្តឱ្យបានឆាប់តាមដែលអាចធ្វើទៅបាន។សំណាកដែលអាចធ្វើតេស្តបានក្នុងរយៈពេល 24 ម៉ោងអាចរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 4°C។សំណាកដែលមិនអាចរកឃើញក្នុងរយៈពេល 24 ម៉ោងគួរតែត្រូវបានរក្សាទុកនៅ -70 ° C ឬទាបជាងនេះ (ប្រសិនបើមិន - រក្សាទុកនៅ 70 ° C នៅក្នុងទូទឹកកកនៅ -20 ° C) ។

សង្ខេប៖ការប្រមូលស្ដង់ដារ ការដឹកជញ្ជូន និងការផ្ទុកសំណាកគំរូគឺចាំបាច់សម្រាប់ការធ្វើតេស្តជាបន្តបន្ទាប់។ភាពអវិជ្ជមានមិនពិតនៃការធ្វើតេស្តមន្ទីរពិសោធន៍ជាច្រើនគឺបណ្តាលមកពីការប្រមូលមិនត្រឹមត្រូវ ការដឹកជញ្ជូន និងការផ្ទុកសំណាកដែលនាំទៅដល់ការរិចរិលនៃអាស៊ីត nucleic របស់មេរោគ។ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ មន្ទីរពិសោធន៍ជាច្រើននៅតែមិនអើពើពីសារៈសំខាន់នៃគំរូ។ខ្ញុំសង្ឃឹមថាអត្ថបទនេះអាចដាស់ការយកចិត្តទុកដាក់របស់មនុស្សគ្រប់គ្នាចំពោះការយកគំរូ និងធ្វើគំរូតាមបែបវិទ្យាសាស្ត្រ និងសមហេតុផលបន្ថែមទៀត!

ផលិតផលដែលពាក់ព័ន្ធ៖

SARS-CoV-2 Variant Nucleic Acid Detection Kit (I) (Multiplex PCR Fluorescent Probe Method)-សម្រាប់​ការ​រក​ឃើញ​ពពួក Mutants មកពីប្រទេសប្រេស៊ីល អាហ្រ្វិកខាងត្បូង និងចក្រភពអង់គ្លេស