តើអ្នកដឹងប៉ុន្មាន

អំពី Nការទាញយកអាស៊ីត ukleic

ការចាប់ផ្តើមនិងចុងបញ្ចប់នៃអាស៊ីត nucleic បន្សុត

អ្វីគ្រប់យ៉ាងគឺពិបាកនៅដើមដំបូង អាស៊ីត nucleic បន្សុតគឺច្រើនបំផុត

ការចាប់ផ្តើមនៃការពិសោធន៍ម៉ូលេគុល សម្រាប់ការពិសោធន៍ជាបន្តបន្ទាប់

ជោគជ័យ ឬបរាជ័យ មានផលប៉ះពាល់យ៉ាងសំខាន់។

Trace/ultra-trace UV spectrophotometer ត្រូវបានអ្នកស្រាវជ្រាវវិទ្យាសាស្ត្រជាច្រើនពេញចិត្ត ព្រោះវាអាចរកឃើញកំហាប់អាស៊ីត nucleic និងប្រូតេអ៊ីន និងសំណល់អ៊ីយ៉ុងអំបិលយ៉ាងសាមញ្ញ រហ័ស និងសន្សំសំចៃ។

ដូចដែលយើងទាំងអស់គ្នាដឹងហើយ A260 មានន័យថាការស្រូបយកអាស៊ីត nucleic តម្លៃ OD, A280 មានន័យថាការស្រូបយកកំហាប់ប្រូតេអ៊ីនតម្លៃ OD, A230 មានន័យថាការស្រូបយកកំហាប់អ៊ីយ៉ុងអំបិលតម្លៃ OD ដូច្នេះ A260 អាចបំប្លែងកំហាប់អាស៊ីត nucleic, A260/280 មានន័យថាសំណល់ប្រូតេអ៊ីន A260/230 មានន័យថាសំណល់អ៊ីយ៉ុងអំបិល ប៉ុន្តែនេះគ្រាន់តែជាការវាស់វែងដោយអ្នកស្រាវជ្រាវប៉ុណ្ណោះ”។សាមញ្ញជឿថាវាអាចពន្យល់ពីភាពបរិសុទ្ធនៃ DNA និង RNA ទៅវិសាលភាពជាក់លាក់មួយ។.វាមិនមែនជាស្តង់ដារតែមួយគត់សម្រាប់កំណត់ទិន្នផល និងភាពបរិសុទ្ធនៃអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកទេ វាគ្រាន់តែជាឯកសារយោងប៉ុណ្ណោះ ហើយវាមិនមែនជា "ស្តង់ដារមាស" ទេ។

សៀវភៅដៃ Thermo Fisher ND-2000 សង្កត់ធ្ងន់លើភាពជឿជាក់នៃលទ្ធផលតេស្ត

ហេតុផលគឺថាលទ្ធផលដែលទទួលបានដោយការប្រើប្រាស់មីក្រូ/អ៊ុលត្រាវីយូវីស្តូមឺម៉ែត្រឆ្លុះបញ្ចាំងតែទិន្នផល និងភាពបរិសុទ្ធនៃអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកពីចំហៀង ហើយមានកត្តាជះឥទ្ធិពលជាច្រើន (ផ្លូវអុបទិក បរិមាណគំរូ កំហាប់គំរូ តម្លៃ pH អ៊ីយ៉ុងផ្សេងទៀតដែលប៉ះពាល់ដល់ការវាស់វែងស្រូបយក។ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ ដោយសារកង្វះភាពជាក់លាក់នៃសម្ភារៈកំណត់តម្លៃស្រូបទាញ DNA ខ្សែតែមួយ ខ្សែ DNA ពីរខ្សែ RNA dNTPs និងប្រូតេអ៊ីនមួយចំនួនមានកម្រិតកំពូលនៃការស្រូបចូលនៅរលកចម្ងាយ 260nm ហើយកំហាប់ដែលកំណត់ដោយ A260 តែមួយគឺមិនចាំបាច់ DNA ឬ RNA ពិតប្រាកដនោះទេ។ការផ្តោតអារម្មណ៍ និងភាពសុចរិត និងការរិចរិលរបស់វាមិនអាចវិនិច្ឆ័យបានទេ។

ដូច្នេះតើធ្វើដូចម្តេចដើម្បីវិនិច្ឆ័យគុណភាពនៃអាស៊ីត nucleic បន្សុតរបស់យើង?បន្ថែមពីលើការប្រើមីក្រូ/អ៊ុលត្រាវីយូអេសអេសអេសអេសអេសអេសអេសអេស សម្រាប់ការរាវរក វិធីសាស្ត្រដូចជាអេឡិចត្រុសជែលអាហ្ការ៉ូស ក៏ត្រូវបានទាមទារផងដែរ ដើម្បីបង្ហាញភាពបរិសុទ្ធ និងសុចរិតភាពនៃអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកដោយមើលឃើញ និងដើម្បីបង្ហាញពីកំហាប់ក្នុងកម្រិតជាក់លាក់មួយ។នៅក្នុងវិធីនេះ ទិន្នផលអាស៊ីត nucleic និងភាពបរិសុទ្ធដែលទទួលបានពីលទ្ធផលនៃការរកឃើញនៃវិធីសាស្រ្តផ្សេងៗគឺគួរឱ្យទុកចិត្ត។

ការប្រៀបធៀបគំនូសតាងពិសោធន៍

DNA ហ្សែននៃកោសិកា H1299 ត្រូវបានស្រង់ចេញដោយប្រើឧបករណ៍ទាញយក DNA របស់ក្រុមហ៊ុន A ហើយការចម្លងរោគមិនបរិសុទ្ធសំខាន់ៗត្រូវបានគេមើលឃើញ ដែលបណ្តាលឱ្យមានតម្លៃ OD ខ្ពស់

(តម្លៃរង្វាស់ OD និង electropherogram ដែលត្រូវគ្នា)

សន្ទស្សន៍វាយតម្លៃ

តើមាន "ស្តង់ដារមាស" សម្រាប់ទិន្នផលអាស៊ីត nucleic និងការធ្វើតេស្តគុណភាពទេ?

តាម​ដែល​យើង​ដឹង គ្មាន​វិធី​សាមញ្ញ លឿន និង​ថោក​នោះ​ទេ។មិនថាវាជា spectrophotometer, gel electrophoresis, ឬ mass spectrometry ទេ ពួកវាទាំងអស់ឆ្លុះបញ្ចាំងពីការផ្តោតអារម្មណ៍ និងភាពបរិសុទ្ធនៃអាស៊ីត nucleic នៅក្នុងដំណោះស្រាយពីទិដ្ឋភាពផ្សេងៗគ្នា ហើយពួកគេត្រូវការវិនិច្ឆ័យដោយយោងគ្នាទៅវិញទៅមក។

សន្ទស្សន៍វាយតម្លៃល្អបំផុតគឺតែងតែកម្មវិធីពិសោធន៍តាមដាន.វាមិនប៉ះពាល់ដល់ប្រសិទ្ធភាពនៃការចម្លងបញ្ច្រាស និងការពង្រីក PCR ទេ។ការទទួលបានផលិតផល amplification ដែលអាចទុកចិត្តបាន និងតម្លៃ Ct ហើយការទទួលបានលំដាប់ពេញលេញដោយលំដាប់គឺការទាញយកអាស៊ីត nucleic ដោយជោគជ័យ។

សរុបមក ទស្សនៈនៃទ្រឹស្តីតែសមាមាត្រគួរតែត្រូវបានជំទាស់ដោយទស្សនៈនៃ "ការប្រើប្រាស់លទ្ធផលពិសោធន៍ខាងក្រោមដ៏ល្អជាប៉ារ៉ាម៉ែត្រស្រង់ចេញដ៏ល្អ"!

ឧបករណ៍ទាញយក DNA RNA របស់ Foregene ត្រូវបានណែនាំ ដើម្បីទទួលបានភាពបរិសុទ្ធ DNA/RNA ខ្ពស់៖

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/