ការបាត់បង់ការស្តាប់ (HL) គឺជាជំងឺពិការអារម្មណ៍ទូទៅបំផុតចំពោះមនុស្ស។នៅក្នុងប្រទេសអភិវឌ្ឍន៍ ប្រហែល 80% នៃករណីថ្លង់មុននិយាយចំពោះកុមារគឺបណ្តាលមកពីកត្តាហ្សែន។ទូទៅបំផុតគឺពិការភាពហ្សែនតែមួយ (ដូចបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 1) ការផ្លាស់ប្តូរហ្សែនចំនួន 124 ត្រូវបានគេរកឃើញថាត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការបាត់បង់ការស្តាប់ដែលមិនមែនជារោគសញ្ញាចំពោះមនុស្ស ហើយនៅសល់គឺបណ្តាលមកពីកត្តាបរិស្ថាន។ការផ្សាំ cochlear (ឧបករណ៍អេឡិចត្រូនិកដាក់ក្នុងត្រចៀកខាងក្នុងដែលផ្តល់ការរំញោចអគ្គិសនីដោយផ្ទាល់ទៅកាន់សរសៃប្រសាទត្រចៀក) គឺជាជម្រើសដ៏មានប្រសិទ្ធភាពបំផុតសម្រាប់ការព្យាបាល HL ធ្ងន់ធ្ងរ ខណៈដែលឧបករណ៍ជំនួយការស្តាប់ (ឧបករណ៍អេឡិចត្រូនិចខាងក្រៅដែលបំប្លែង និងពង្រីករលកសំឡេង) អាចជួយអ្នកជំងឺដែលមាន HL កម្រិតមធ្យម។ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ បច្ចុប្បន្នមិនមានថ្នាំសម្រាប់ព្យាបាល HL (GHL) តំណពូជទេ។ក្នុងរយៈពេលប៉ុន្មានឆ្នាំថ្មីៗនេះ ការព្យាបាលដោយហ្សែនបានទទួលការយកចិត្តទុកដាក់កាន់តែខ្លាំងឡើង ដែលជាវិធីសាស្រ្តដ៏ជោគជ័យមួយក្នុងការព្យាបាលការខូចមុខងារត្រចៀកខាងក្នុង។
រូប ១.ការចែកចាយប្រភេទបំរែបំរួលដែលទាក់ទងនឹងមនុស្សថ្លង់។[1]
ថ្មីៗនេះ អ្នកវិទ្យាសាស្ត្រមកពីវិទ្យាស្ថាន Salk និងសាកលវិទ្យាល័យ Sheffield បានបោះពុម្ពផ្សាយលទ្ធផលស្រាវជ្រាវមួយក្នុងការព្យាបាលដោយម៉ូលេគុល - វិធីសាស្ត្រ និងការអភិវឌ្ឍន៍គ្លីនិក [2] ដែលបង្ហាញពីការរំពឹងទុកយ៉ាងទូលំទូលាយសម្រាប់ការព្យាបាលដោយហ្សែន vivo នៃជំងឺថ្លង់តំណពូជ។លោក Uri Manor ជំនួយការសាស្ត្រាចារ្យស្រាវជ្រាវនៅវិទ្យាស្ថាន Salk និងជានាយកមជ្ឈមណ្ឌល Waitt សម្រាប់ Advanced Biophotonics បាននិយាយថា គាត់កើតមកជាមួយនឹងការបាត់បង់ការស្តាប់យ៉ាងធ្ងន់ធ្ងរ ហើយមានអារម្មណ៍ថាការស្តារការស្តាប់ឡើងវិញនឹងក្លាយជាអំណោយដ៏អស្ចារ្យ។ការស្រាវជ្រាវពីមុនរបស់គាត់បានរកឃើញថា Eps8 គឺជាប្រូតេអ៊ីនដែលមាននិយតកម្ម actin ជាមួយនឹងសកម្មភាពភ្ជាប់ actin និង capping ។នៅក្នុងកោសិកាសក់ cochlear ស្មុគស្មាញប្រូតេអ៊ីនដែលបង្កើតឡើងដោយ Eps8 ជាមួយ MYO15A, WHIRLIN, GPSM2 និង GNAI3 ភាគច្រើនមាននៅក្នុងគន្លឹះនៃ stereocilia វែង ដែលរួមគ្នាជាមួយ MYO15A ធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្ម BAIAP2L2 នៅគន្លឹះនៃ stereocilia ខ្លីគឺត្រូវបានទាមទារសម្រាប់ការថែរក្សាបណ្តុំសក់។ដូច្នេះ Eps8 អាចធ្វើនិយ័តកម្មប្រវែងនៃ stereocilia នៃកោសិកាសក់ដែលមានសារៈសំខាន់សម្រាប់មុខងារស្តាប់ធម្មតា;ការលុប ឬបំរែបំរួល Eps8 នឹងនាំទៅរក stereocilia ខ្លី ដែលធ្វើឱ្យវាមិនអាចបំប្លែងសំឡេងបានត្រឹមត្រូវទៅជាសញ្ញាអគ្គិសនីសម្រាប់ការយល់ឃើញរបស់ខួរក្បាល ដែលនាំឱ្យថ្លង់។.ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ អ្នកសហការ Walter Marcotti សាស្ត្រាចារ្យនៅសាកលវិទ្យាល័យ Sheffield បានរកឃើញថាកោសិកាសក់មិនអាចអភិវឌ្ឍជាធម្មតាបានទេប្រសិនបើគ្មាន Eps8 នោះទេ។នៅក្នុងការសិក្សានេះ Manor និង Marcotti បានសហការគ្នាដើម្បីស៊ើបអង្កេតថាតើការបន្ថែម Eps8 ទៅក្នុងកោសិកា stereociliary អាចស្តារមុខងាររបស់ពួកគេឡើងវិញបានដែរឬទេ ហើយផ្ទុយទៅវិញ ធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវការស្តាប់នៅក្នុងសត្វកណ្តុរ។ក្រុមស្រាវជ្រាវបានប្រើវ៉ិចទ័រ Anc80L65 ដែលទាក់ទងនឹងមេរោគ adeno-associated (AAV) ដើម្បីបញ្ជូនការសរសេរកូដដែលមានប្រភេទ EPS8 ទៅក្នុង cochlea នៃសត្វកណ្តុរ Eps8-/- ដែលទើបនឹងកើត P1-P2 ដោយការចាក់ភ្នាសបង្អួចមូល។នៅក្នុងកោសិកាសក់កណ្ដុរ មុខងាររបស់ stereocilia ត្រូវបានជួសជុលមុនពេលពួកវាពេញវ័យ។ហើយប្រសិទ្ធភាពនៃការជួសជុលត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈដោយបច្ចេកវិទ្យារូបភាព និងការវាស់វែងនៃ stereocilia ។លទ្ធផលបានបង្ហាញថា Eps8 បង្កើនប្រវែងនៃ stereocilia និងស្តារមុខងារកោសិកាសក់នៅក្នុងកោសិកាប្រេកង់ទាប។ពួកគេក៏បានរកឃើញថា យូរៗទៅកោសិកាហាក់ដូចជាបាត់បង់សមត្ថភាពក្នុងការជួយសង្គ្រោះដោយការព្យាបាលដោយហ្សែននេះ។ភាពពាក់ព័ន្ធនោះគឺថា ការព្យាបាលនេះអាចនឹងត្រូវគ្រប់គ្រងក្នុងស្បូន ព្រោះកោសិកាសក់ Eps8-/- អាចមានភាពចាស់ទុំ ឬខូចទ្រង់ទ្រាយលើសពីការជួសជុលបន្ទាប់ពីសត្វកណ្តុរកើតមក។Manor បាននិយាយថា "Eps8 គឺជាប្រូតេអ៊ីនដែលមានមុខងារខុសៗគ្នាជាច្រើន ហើយនៅមានច្រើនទៀតដែលត្រូវរុករក"។ការស្រាវជ្រាវនាពេលអនាគតនឹងរួមបញ្ចូលការស៊ើបអង្កេតពីឥទ្ធិពលនៃការព្យាបាលដោយហ្សែន Eps8 ក្នុងការស្តារការស្តាប់ឡើងវិញនៅដំណាក់កាលអភិវឌ្ឍន៍ផ្សេងៗគ្នា និងថាតើវាអាចពន្យារឱកាសព្យាបាលដែរឬទេ។ចៃដន្យនៅក្នុងខែវិច្ឆិកា ឆ្នាំ 2020 សាស្រ្តាចារ្យ KarenB Avraham នៃសាកលវិទ្យាល័យ Tel Aviv ក្នុងប្រទេសអ៊ីស្រាអែលបានបោះពុម្ភផ្សាយលទ្ធផលរបស់គាត់នៅក្នុងទិនានុប្បវត្តិ EMBO Molecular Medicine [3] ដោយប្រើបច្ចេកវិទ្យាព្យាបាលហ្សែនប្រកបដោយភាពច្នៃប្រឌិតដើម្បីបង្កើតមេរោគសំយោគដែលមិនបង្កគ្រោះថ្នាក់ដែលទាក់ទងនឹង adeno-associated AAV9-PHP ។ខ, ពិការភាពហ្សែននៅក្នុងកោសិកាសក់របស់សត្វកណ្ដុរ Syne4-/- ត្រូវបានជួសជុលដោយការចាក់មេរោគដែលផ្ទុកនូវកូដនៃ Syne4 ចូលទៅក្នុងត្រចៀកខាងក្នុងរបស់សត្វកណ្តុរ ដែលអនុញ្ញាតឱ្យវាចូលទៅក្នុងកោសិកាសក់ និងបញ្ចេញសារធាតុហ្សែនដែលនាំឱ្យពួកវាមានភាពចាស់ទុំ និងដំណើរការជាធម្មតា (ដូចក្នុងរូបទី 2)។
រូប ២.ការបង្ហាញគ្រោងការណ៍នៃកាយវិភាគសាស្ត្រត្រចៀកខាងក្នុងដោយផ្តោតលើសរីរាង្គនៃ Corti និងមុខងារកោសិកានៃ nesprin-4 ។
វាអាចត្រូវបានគេមើលឃើញថាការប្រើប្រាស់ការព្យាបាលដោយហ្សែនដើម្បីសម្រេចបាននូវគោលបំណងនៃការព្យាបាលជំងឺតំណពូជនៅកម្រិតហ្សែនដោយការបញ្ចូល ដកចេញ ឬកែតម្រូវហ្សែនដែលផ្លាស់ប្តូរណាមួយសម្រាប់ការព្យាបាល (ពោលគឺការគ្រប់គ្រងការផ្លាស់ប្តូរហ្សែនក្នុងជម្ងឺ) មានប្រសិទ្ធភាពព្យាបាលខ្ពស់។ការរំពឹងទុកនៃកម្មវិធី។វិធីសាស្ត្រព្យាបាលហ្សែនបច្ចុប្បន្នសម្រាប់ជំងឺថ្លង់ខ្វះហ្សែនអាចបែងចែកជាប្រភេទដូចខាងក្រោម៖
ការជំនួសហ្សែន
ការជំនួសហ្សែនគឺជាទម្រង់ "ត្រង់" បំផុតនៃការព្យាបាលហ្សែន ដោយផ្អែកលើការកំណត់អត្តសញ្ញាណ និងការជំនួសហ្សែនដែលមានបញ្ហាជាមួយនឹងច្បាប់ចម្លងហ្សែនធម្មតា ឬប្រភេទព្រៃ។ការសិក្សាព្យាបាលហ្សែនត្រចៀកខាងក្នុងដែលទទួលបានជោគជ័យជាលើកដំបូងសម្រាប់ការបាត់បង់ការស្តាប់ដែលបណ្តាលមកពីការលុបហ្សែន vesicular glutamate transporter 3 (VGLUT3) ។ការផ្តល់ការសម្របសម្រួលដោយ AAV1 នៃការបញ្ចេញមតិខាងក្រៅ VGLUT3 នៅក្នុងកោសិការោមត្រចៀកខាងក្នុង (IHCs) អាចបណ្តាលឱ្យមានការស្តារការស្តាប់ប្រកបដោយនិរន្តរភាព ការស្ដារឡើងវិញនូវរូបសញ្ញានៃឆ្អឹងជំនីរផ្នែកខ្លះ និងការឆ្លើយតបដោយប្រកាច់ [4] ។ទោះបីជាយ៉ាងណាក៏ដោយ នៅក្នុងឧទាហរណ៍ រួមទាំងការជំនួសហ្សែនដែលបញ្ជូនដោយ AAV ពីរដែលបានពិពណ៌នានៅក្នុងការណែនាំខាងលើ វាជារឿងសំខាន់ក្នុងការកត់សម្គាល់ថា គំរូកណ្តុរដែលប្រើសម្រាប់ប្រភេទមួយចំនួននៃការលុបហ្សែននៃការបាត់បង់ការស្តាប់តាមតំណពូជគឺខុសគ្នាជាបណ្ដោះអាសន្នពីមនុស្ស ហើយនៅក្នុងសត្វកណ្តុរ P1 ត្រចៀកខាងក្នុងស្ថិតនៅក្នុងដំណាក់កាលនៃការអភិវឌ្ឍន៍។ផ្ទុយទៅវិញ មនុស្សកើតមកមានត្រចៀកខាងក្នុងចាស់ទុំ។ភាពខុសគ្នានេះរារាំងការអនុវត្តលទ្ធផលកណ្តុរដែលអាចកើតមានចំពោះការព្យាបាលជម្ងឺថ្លង់តំណពូជរបស់មនុស្ស លុះត្រាតែការព្យាបាលដោយហ្សែនត្រូវបានបញ្ជូនទៅត្រចៀកកណ្ដុរពេញវ័យ។
ការកែសម្រួលហ្សែន៖ CRISPR/Cas9
បើប្រៀបធៀបជាមួយ "ការជំនួសហ្សែន" ការអភិវឌ្ឍន៍នៃបច្ចេកវិទ្យាកែសម្រួលហ្សែនបាននាំមកនូវពន្លឺថ្ងៃនៃការព្យាបាលជំងឺហ្សែនពីឫសគល់។សំខាន់ វិធីសាស្ត្រកែហ្សែនបង្កើតឱ្យមានការខ្វះខាតនៃវិធីសាស្ត្រព្យាបាលហ្សែនហួសហេតុបែបប្រពៃណី ដែលមិនស័ក្តិសមសម្រាប់ជំងឺថ្លង់តំណពូជលេចធ្លោ ហើយបញ្ហាដែលវិធីសាស្ត្រ overexpression នេះមិនមានរយៈពេលយូរនោះទេ។បន្ទាប់ពីអ្នកស្រាវជ្រាវជនជាតិចិនបានគោះចេញនូវប្រភេទ Myo6C442Y mutant allele នៅក្នុងសត្វកណ្តុរ Myo6WT/C442Y ដោយប្រើប្រព័ន្ធកែសម្រួលហ្សែន AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2 ហើយក្នុងរយៈពេល 5 ខែបន្ទាប់ពីការគោះចេញ សត្វកណ្ដុរមុខងារ auditory នៃគំរូត្រូវបានស្ដារឡើងវិញ។ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ គេក៏សង្កេតឃើញថា អត្រារស់រានមានជីវិតនៃកោសិកាសក់នៅក្នុងត្រចៀកខាងក្នុងត្រូវបានប្រសើរឡើង រូបរាងរបស់ cilia មានភាពទៀងទាត់ ហើយសូចនាករ electrophysiological ត្រូវបានកែតម្រូវ [5] ។នេះគឺជាការសិក្សាលើកដំបូងនៅលើពិភពលោកដែលប្រើបច្ចេកវិទ្យា CRISPR/Cas9 សម្រាប់ការព្យាបាលថ្លង់តំណពូជដែលបណ្តាលមកពីការផ្លាស់ប្តូរហ្សែន Myo6 ហើយវាគឺជាវឌ្ឍនភាពស្រាវជ្រាវដ៏សំខាន់នៃបច្ចេកវិទ្យាកែសម្រួលហ្សែនសម្រាប់ការព្យាបាលថ្លង់តំណពូជ។ការបកប្រែគ្លីនិកនៃការព្យាបាលផ្តល់នូវមូលដ្ឋានវិទ្យាសាស្ត្រដ៏រឹងមាំ។
វិធីសាស្រ្តផ្តល់ការព្យាបាលដោយហ្សែន
ដើម្បីឱ្យការព្យាបាលហ្សែនទទួលបានជោគជ័យ ម៉ូលេគុល DNA អាក្រាតមិនអាចជ្រាបចូលទៅក្នុងកោសិកាប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពទេ ដោយសារភាពធន់នឹងទឹក និងបន្ទុកអវិជ្ជមាននៃក្រុមផូស្វាត ហើយដើម្បីធានាបាននូវភាពសុចរិតនៃម៉ូលេគុលអាស៊ីត nucleic បន្ថែម វិធីសាស្ត្រសុវត្ថិភាព និងប្រសិទ្ធភាពត្រូវតែជ្រើសរើស។DNA បន្ថែមត្រូវបានបញ្ជូនទៅកោសិកាគោលដៅ ឬជាលិកា។AAV ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយជាយានដឹកជញ្ជូនសម្រាប់ការព្យាបាលជំងឺដោយសារតែឥទ្ធិពលនៃការឆ្លងខ្ពស់ ភាពស៊ាំនឹងមេរោគទាប និងត្រូពិចទូលំទូលាយចំពោះប្រភេទជាលិកាផ្សេងៗ។នាពេលបច្ចុប្បន្ននេះ ការងារស្រាវជ្រាវដ៏ធំមួយបានកំណត់ពីតំបន់ត្រូពិចនៃប្រភេទរងផ្សេងៗគ្នានៃ AAV ដែលទាក់ទងទៅនឹងប្រភេទកោសិកាផ្សេងៗគ្នានៅក្នុងកណ្តុរ cochlea ។ការប្រើប្រាស់លក្ខណៈនៃការចែកចាយ AAV រួមបញ្ចូលគ្នាជាមួយអ្នកផ្សព្វផ្សាយតាមកោសិកាអាចសម្រេចបាននូវកន្សោមជាក់លាក់កោសិកា ដែលអាចកាត់បន្ថយផលប៉ះពាល់ក្រៅគោលដៅ។លើសពីនេះទៀត ជាជម្រើសមួយសម្រាប់វ៉ិចទ័រ AAV បែបប្រពៃណី វ៉ិចទ័រ AAV សំយោគថ្មីកំពុងត្រូវបានអភិវឌ្ឍឥតឈប់ឈរ និងបង្ហាញពីសមត្ថភាពបញ្ជូនដ៏ប្រសើរនៅក្នុងត្រចៀកខាងក្នុង ដែល AAV2/Anc80L65 ត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយបំផុត។វិធីសាស្រ្តនៃការចែកចាយមិនមែនមេរោគអាចត្រូវបានបែងចែកបន្ថែមទៀតទៅជាវិធីសាស្ត្ររូបវន្ត (ការចាក់បញ្ចូលមីក្រូ និងអេឡិចត្រូផូរ័រ) និងវិធីសាស្ត្រគីមី (ផ្អែកលើជាតិខ្លាញ់ ប៉ូលីម៊ែរ និង ណាណូមាស)។វិធីសាស្រ្តទាំងពីរនេះត្រូវបានគេប្រើប្រាស់ក្នុងការព្យាបាលជម្ងឺថ្លង់តំណពូជ ហើយបានបង្ហាញពីគុណសម្បត្តិ និងដែនកំណត់ខុសៗគ្នា។បន្ថែមពីលើយានជំនិះសម្រាប់ការព្យាបាលហ្សែនជាយានជំនិះ វិធីសាស្រ្តផ្សេងៗសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងហ្សែន vivo អាចត្រូវបានប្រើប្រាស់ដោយផ្អែកលើប្រភេទកោសិកាគោលដៅផ្សេងៗគ្នា ផ្លូវនៃការគ្រប់គ្រង និងប្រសិទ្ធភាពព្យាបាល។រចនាសម្ព័ន្ធស្មុគ្រស្មាញនៃត្រចៀកខាងក្នុងធ្វើឱ្យពិបាកក្នុងការទៅដល់កោសិកាគោលដៅ ហើយការចែកចាយភ្នាក់ងារកែសម្រួលហ្សែនមានភាពយឺតយ៉ាវ។Membranous labyrinth មានទីតាំងស្ថិតនៅក្នុងប្រហោងឆ្អឹងនៃឆ្អឹងខាងសាច់ឈាម ហើយរួមបញ្ចូលនូវបំពង់ cochlear duct, semicircular duct, Utricle និង balloon ។ភាពឯកោដែលទាក់ទងរបស់វា ចរន្តឈាមកូនកណ្តុរតិចតួច និងការបំបែកចេញពីឈាមដោយរបាំងឈាម កំណត់ការចែកចាយជាប្រព័ន្ធប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពនៃការព្យាបាលដល់កូនកណ្តុរដែលទើបនឹងកើតតែប៉ុណ្ណោះ។ដើម្បីទទួលបាន titers មេរោគដែលសមរម្យសម្រាប់ការព្យាបាលហ្សែន ការចាក់ដោយផ្ទាល់នូវវ៉ិចទ័រមេរោគចូលទៅក្នុងត្រចៀកខាងក្នុងគឺជាការចាំបាច់។ផ្លូវដែលបានបង្កើតឡើងនៃការចាក់រួមមាន [6]: (1) ភ្នាសបង្អួចមូល (RWM), (2) ការធ្វើត្រាច់ចរ, (3) endolymphatic ឬ perilymphatic cochleostomy, (4) ភ្នាសបង្អួចមូលបូកនឹងបំពង់ fenestration (CF) (ដូចក្នុងរូបទី 3)។
រូប ៣.ការផ្តល់ត្រចៀកខាងក្នុងនៃការព្យាបាលហ្សែន។
ទោះបីជាមានភាពជឿនលឿនជាច្រើនត្រូវបានបង្កើតឡើងក្នុងការព្យាបាលដោយហ្សែន ដោយផ្អែកលើគោលដៅនៃការបកប្រែគ្លីនិកក៏ដោយ ការងារបន្ថែមទៀតត្រូវធ្វើមុនពេលការព្យាបាលដោយហ្សែនអាចក្លាយជាជម្រើសនៃការព្យាបាលដំបូងសម្រាប់អ្នកជំងឺដែលមានជំងឺហ្សែន ជាពិសេសក្នុងការអភិវឌ្ឍន៍វ៉ិចទ័រប្រកបដោយសុវត្ថិភាព និងប្រសិទ្ធភាព និងវិធីសាស្ត្រសម្រាលកូន។ប៉ុន្តែយើងជឿជាក់ថានៅពេលអនាគតដ៏ខ្លី ការព្យាបាលប្រភេទទាំងនេះនឹងក្លាយជាគន្លឹះនៃការព្យាបាលផ្ទាល់ខ្លួន ហើយនឹងមានឥទ្ធិពលវិជ្ជមានយ៉ាងខ្លាំងទៅលើជីវិតរបស់មនុស្សដែលមានជំងឺហ្សែន និងគ្រួសាររបស់ពួកគេ។
Foregene ក៏បានដាក់ឱ្យដំណើរការនូវឧបករណ៍ពិនិត្យកម្រិតខ្ពស់សម្រាប់ហ្សែនគោលដៅ ដែលមានល្បឿនលឿន និងអាចធ្វើប្រតិចារិកបញ្ច្រាស និងប្រតិកម្ម qPCR ដោយមិនចាំបាច់ដក RNA ចេញ។
តំណភ្ជាប់ផលិតផល
ឧបករណ៍ Cell Direct RT-qPCR—Taqman/SYBR GREEN I
សម្រាប់ព័ត៌មានបន្ថែមអំពីផលិតផល សូមទំនាក់ទំនង៖
ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ថ្ងៃទី ០២ ខែកញ្ញា ឆ្នាំ ២០២២
