1: ជំនួសការផ្គត់ផ្គង់ពិសោធន៍ទាន់ពេលវេលា

ដំឡើង (NTC) ការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមាន ហើយធ្វើវាម្តងទៀតច្រើនដង។នៅពេលដែលវាត្រូវបានរកឃើញថាមានការចម្លងរោគផលិតផល PCR នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ សូមជំនួសការផ្គត់ផ្គង់ពិសោធន៍ទាំងអស់ឱ្យទាន់ពេលវេលា។ដូចជា៖ ពនឺឡើងវិញ និងរៀបចំថ្នាំ primers មាប់មគឡើងវិញ ចុងបំពង់ EP tube ddH2O ជាដើម ជំនួសដោយ pipette ថ្មី ហើយខ្ចីបន្ទប់ពិសោធន៍ផ្សេងទៀតជាបណ្តោះអាសន្ន ដើម្បីធ្វើការពិសោធន៍ PCR ។មន្ទីរពិសោធន៍ដែលមានមេរោគត្រូវបញ្ចេញខ្យល់ និងបញ្ចេញកាំរស្មីអ៊ុលត្រាវីយូឡេ រហូតដល់ការចម្លងរោគផលិតផល PCR ត្រូវបានលុបចោល មុនពេលបន្តការពិសោធន៍។

2: ពង្រីកពេលវេលានៃការប៉ះពាល់នឹងកាំរស្មីយូវី

វាគួរឱ្យកត់សម្គាល់ថាដើម្បីលុបការចម្លងរោគ DNA វិទ្យុសកម្មអ៊ុលត្រាវីយូឡេជាទៀងទាត់គួរតែត្រូវបានពន្យារពេល 2 ម៉ោងជាងធម្មតា។ទោះបីជាយ៉ាងនេះក៏ដោយ ឥទ្ធិពលនៃវិទ្យុសកម្មកាំរស្មីយូវីលើការដកបំណែកតូចៗ (ក្រោម 200bp) នៃការចម្លងរោគ DNA នៅតែមិនល្អ។

រលកអ៊ុលត្រាវីយូឡេ (nm) ជាទូទៅគឺ 254/300nm ហើយវាគ្រប់គ្រាន់ក្នុងការបំភ្លឺរយៈពេល 30 នាទី។វាគួរតែត្រូវបានកត់សម្គាល់ថានៅពេលជ្រើសរើសកាំរស្មី UV ដើម្បីលុបបំបាត់ការចម្លងរោគនៃផលិតផល PCR ដែលនៅសល់រយៈពេលនៃផលិតផល PCR និងការចែកចាយមូលដ្ឋាននៅក្នុងលំដាប់ផលិតផលគួរតែត្រូវបានពិចារណា។ការ irradiation កាំរស្មី UV គឺមានប្រសិទ្ធិភាពសម្រាប់តែបំណែកវែងលើសពី 500 bp និងមានឥទ្ធិពលតិចតួចលើបំណែកខ្លី។

កំឡុងពេលវិទ្យុសកម្មកាំរស្មី UV មូលដ្ឋាន pyrimidine នៅក្នុងផលិតផល PCR នឹងបង្កើតជា dimers ។dimers ទាំងនេះអាចបញ្ចប់ផ្នែកបន្ថែម ប៉ុន្តែមិនមែន pyrimidines ទាំងអស់នៅក្នុងខ្សែ DNA អាចបង្កើតជា dimers នោះទេ ហើយការ irradiation កាំរស្មី UV ក៏អាចបំបែក dimers ផងដែរ។.កម្រិតនៃការបង្កើត dimer អាស្រ័យលើប្រវែងរលកកាំរស្មីយូវី ប្រភេទនៃ pyrimidine dimer និងលំដាប់នៃ nucleotides ដែលនៅជាប់នឹងកន្លែង dimer។ដូច្នេះប្រសិនបើបំណែក PCR ពង្រីកមានទំហំតូច វាត្រូវបានណែនាំឱ្យប្រើប្រព័ន្ធប្រឆាំងមេរោគ PCR របស់ផលិតផល UNG ។

3: ជាទូទៅគេប្រើឧបករណ៍រើសអេតចាយការបំពុល DNA

Aerosols ត្រូវបានបង្កើតយ៉ាងងាយស្រួលនៅពេលដែល pipettes ត្រូវបានបន្ថែម ដែលពិបាកក្នុងការជៀសវាង ហើយវានឹងដោះស្រាយបានយ៉ាងឆាប់រហ័ស។ដូច្នេះហើយ វាពិតជាជម្រើសដ៏ល្អមួយក្នុងការប្រើប្រាស់ជាញឹកញាប់ឧបករណ៍រើសអេតចាយបំពុល DNA ពិសេសដើម្បីការពារការរីករាលដាលនៃការបំពុល DNA ។

4: ប្រើប្រព័ន្ធប្រឆាំងការបំពុល UNG

បន្ទាប់ពីការចម្លងរោគផលិតផល PCR ត្រូវបានដកចេញ មន្ទីរពិសោធន៍ធ្វើតេស្តអាចប្រើប្រព័ន្ធការពារការចម្លងរោគផលិតផល PCR របស់ UNG ដើម្បីការពារការចម្លងរោគផលិតផល PCR ។នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ទូទៅ អ្នកអាចអនុវត្តភាគថាសពិសោធន៍សាមញ្ញ បំបែកតំបន់ផលិតផល PCR យ៉ាងតឹងរ៉ឹងពីផ្នែកផ្សេងទៀត បង្កើតច្បាប់ និងបទប្បញ្ញត្តិមន្ទីរពិសោធន៍មួយចំនួន និងធ្វើការបណ្តុះបណ្តាលពាក់ព័ន្ធដើម្បីការពារការកើតឡើងនៃការចម្លងរោគផលិតផល PCR ។

អនុសាសន៍៖ ការបង្កើតមន្ទីរពិសោធន៍ PCR ដែលសមហេតុផល ការថែរក្សាបរិស្ថាន PCR ដ៏ល្អ ការបង្កើតនីតិវិធីប្រតិបត្តិការ PCR ស្តង់ដារ និងការដាំដុះការយល់ដឹងអំពីប្រតិបត្តិការយ៉ាងម៉ត់ចត់របស់អ្នកពិសោធន៍ គឺជាគន្លឹះក្នុងការទប់ស្កាត់ ឬកាត់បន្ថយការបំពុលនៃការពិសោធន៍ PCR ។