លក្ខណៈពិសេសលេចធ្លោនៃប្រតិកម្ម PCR គឺសមត្ថភាពពង្រីកដ៏ធំរបស់វា និងភាពប្រែប្រួលខ្ពស់ខ្លាំង។ដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាព PCR និងប្រសិទ្ធភាពនៃការរកឃើញ យើងប្តេជ្ញាធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវសមត្ថភាពពង្រីក PCR និងភាពរសើបនៃការរកឃើញ ប៉ុន្តែការឈឺក្បាលកំពុងស្ថិតក្នុងដំណើរការពិសោធន៍។ភាពវិជ្ជមានមិនពិតកើតឡើងជាញឹកញាប់ ហើយចំនួនតិចតួចបំផុតនៃការចម្លងមេរោគគំរូ ឬការចម្លងរោគផលិតផល PCR អាចបណ្តាលឱ្យមានភាពវិជ្ជមានមិនពិតនៅក្នុងការពិសោធន៍។
ការចម្លងរោគ PCR ចំនួនប្រាំប្រភេទ
មានហេតុផលជាច្រើនសម្រាប់ការចម្លងរោគ PCR ដែលអាចបែងចែកជាប្រភេទដូចខាងក្រោមៈ
ការបំពុលសំណាកសំណាកគឺបណ្តាលមកពីការចម្លងរោគនៃកុងតឺន័រសម្រាប់ប្រមូលសំណាក ឬនៅពេលដែលសំណាកត្រូវបានដាក់ វាត្រូវបានលេចធ្លាយចេញពីកុងតឺន័រដោយសារតែការផ្សាភ្ជាប់រលុង ឬសំណាកត្រូវបានជាប់នឹងខាងក្រៅធុង ដែលបណ្តាលឱ្យមានការចម្លងរោគឆ្លង។ការចម្លងរោគនាំឱ្យមានការចម្លងរោគរវាងគំរូ;សំណាកអតិសុខុមប្រាណមួយចំនួន ជាពិសេសមេរោគអាចរីករាលដាលជាមួយ aerosols ឬបង្កើតជា aerosols ដែលបណ្តាលឱ្យមានការចម្លងរោគទៅវិញទៅមក។
មូលហេតុចំបងគឺថាក្នុងអំឡុងពេលនៃការរៀបចំសារធាតុ PCR កាំភ្លើងគំរូ ធុង ទឹកចម្រោះពីរដង និងដំណោះស្រាយផ្សេងទៀតត្រូវបានបំពុលដោយគំរូ PCR nucleic acid ។
នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល និងមន្ទីរពិសោធន៍មួយចំនួនដែលប្រើ plasmids ក្លូនជាការត្រួតពិនិត្យវិជ្ជមាន បញ្ហានៃការចម្លងរោគនៃប្លាស្មាតគឺជារឿងធម្មតាផងដែរ។ដោយសារតែខ្លឹមសារនៃការក្លូន plasmid ក្នុងបរិមាណឯកតាគឺខ្ពស់ណាស់ ហើយឧបករណ៍ និងសារធាតុប្រតិកម្មបន្ថែមទៀតគឺត្រូវការជាចាំបាច់ក្នុងដំណើរការបន្សុត ហើយប្លាស្មានៅក្នុងកោសិការស់ទំនងជាត្រូវបានបំពុលដោយសារការលូតលាស់ខ្លាំង និងសមត្ថភាពបន្តពូជរបស់កោសិការស់។
ការចម្លងរោគនៃផលិតផល amplified គឺជាបញ្ហាចម្លងរោគទូទៅបំផុតនៅក្នុងប្រតិកម្ម PCR ។ដោយសារតែបរិមាណចម្លងនៃផលិតផល PCR មានទំហំធំ (ជាទូទៅ 1013 ច្បាប់ចម្លង/ml) ដែលខ្ពស់ជាងដែនកំណត់នៃចំនួនច្បាប់ចម្លងនៃការរកឃើញ PCR ចំនួនតិចតួចនៃការចម្លងរោគផលិតផល PCR អាចបណ្តាលឱ្យមានភាពវិជ្ជមានមិនពិត។
ការបំពុល Aerosol គឺជាទម្រង់ដែលទំនងបំផុតនៃការចម្លងរោគនៃផលិតផល PCR ហើយវាក៏ជាការងាយស្រួលបំផុតក្នុងការមើលរំលងផងដែរ។វាត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយការកកិតរវាងផ្ទៃរាវនិងខ្យល់។ជាទូទៅ ការចម្លងរោគនៃអេរ៉ូសូលអាចត្រូវបានបង្កើតឡើងនៅពេលដែលគម្របត្រូវបានបើក នៅពេលដែលសំណាកត្រូវបានស្រូបយក ឬសូម្បីតែនៅពេលដែលបំពង់ប្រតិកម្មត្រូវបានរង្គោះរង្គើយ៉ាងខ្លាំង។យោងតាមការគណនា ភាគល្អិត aerosol អាចផ្ទុកបាន 48,000 ច្បាប់ចម្លង ដូច្នេះការបំពុលដែលបណ្តាលមកពីវាគឺជាបញ្ហាដែលសមនឹងទទួលបានការយកចិត្តទុកដាក់ជាពិសេស។
ជាពិសេស មន្ទីរពិសោធន៍ធ្វើតេស្តតែងតែប្រើ primers ដូចគ្នា ដើម្បីធ្វើតេស្តហ្សែនជាក់លាក់មួយ។យូរ ៗ ទៅបរិមាណដ៏ច្រើននៃការចម្លងរោគផលិតផល PCR នឹងកើតឡើងនៅក្នុងបន្ទប់ពិសោធន៍។នៅពេលដែលការចម្លងរោគបែបនេះកើតឡើងវាពិបាកក្នុងការលុបបំបាត់វាក្នុងរយៈពេលដ៏ខ្លី។
ចំពោះការបំពុលបីប្រភេទដំបូង យើងអាចប្រើមធ្យោបាយដ៏មានប្រសិទ្ធភាពដើម្បីជៀសវាង ប៉ុន្តែការបំពុលដែលបណ្តាលមកពីផលិតផល PCR ពិបាកនឹងការពារ ជាពិសេសក្នុងការសាងសង់មន្ទីរពិសោធន៍ PCR ដែលមិនមានស្តង់ដារ។នៅក្នុងដំណើរការ PCR នៅពេលដែលចុងបំពង់បឺត និងផ្លុំរាវ ហើយគម្របបំពង់ PCR ត្រូវបានបើក នោះ aerosol នឹងត្រូវបានបង្កើតឡើង។ម៉ូលេគុល DNA ដែលផ្ទុកដោយ aerosol (aerosol មួយអាចផ្ទុក DNA រាប់ម៉ឺន DNA) ពិបាកនឹងលុបបំបាត់ ព្រោះវាអណ្តែតលើអាកាស។នៅពេលដែលការពិសោធន៍ PCR ជុំបន្ទាប់ត្រូវបានណែនាំ ភាពវិជ្ជមានមិនពិតនឹងកើតឡើងដោយជៀសមិនរួច។
ដូចដែលបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពខាងក្រោម ការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមានក៏បានពង្រីកការចាប់អារម្មណ៍ដែលត្រូវគ្នាផងដែរ៖
ផ្នែកដំបូងនៃបញ្ហានៃការបំពុល និងការការពារ PCR នេះត្រូវបានណែនាំនៅទីនេះ។អត្ថបទបន្ទាប់នឹងនាំមកជូនអ្នកនូវផ្នែកទីពីរ "ការការពារការចម្លងរោគផលិតផល PCR" ដូច្នេះរង់ចាំតាមដានទាំងអស់គ្នា!
ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ថ្ងៃទី ២៥ ខែកក្កដា ឆ្នាំ ២០១៧
