សេចក្តីផ្តើម៖

RNA ឈ្មោះវិទ្យាសាស្រ្ត ribonucleic acid អក្សរកាត់របស់វាមកពី RiboNucleic Acid គឺជាប្រភេទអាស៊ីត nucleic ដែលបង្កើតឡើងដោយការភ្ជាប់យ៉ាងហោចណាស់រាប់សិបនៃ ribonucleotides តាមរយៈចំណង phosphodiester ។

មូលដ្ឋាននៃការរុករក RNA គឺដើម្បីទាញយក RNA សរុបដែលគ្មានការបំពុល ហើយគោលការណ៍ជាមូលដ្ឋាននៃការទាញយក RNA អាចត្រូវបានសង្ខេបដូចខាងក្រោម:

1. រំខានកោសិកាជាមុនសិន

2. បន្ទាប់មកយកសារធាតុមិនបរិសុទ្ធម៉ាក្រូម៉ូលេគុល (ប្រូតេអ៊ីន ខ្លាញ់ ឌីអិនអេ ជាដើម)

3. ជាចុងក្រោយ RNA ត្រូវបាន precipitated ខណៈពេលដែលយកអំបិល និងសារធាតុរំលាយសរីរាង្គ និងបន្សុត RNA បន្ថែមទៀត។

អតីតកាល និងបច្ចុប្បន្ននៃវិធីសាស្ត្រស្រង់ចេញ

ជំនាន់ទី 1 នៃវិធីសាស្ត្រទាញយក RNA គឺជាវិធីសាស្ត្រទឹកភ្លៀង TRIzol (សារធាតុដែលប្រើរួមមាន guanidine isothiocyanate, phenol, chloroform ។

ក្រោយមក ជីតាបានលក់ប៉ាតង់នេះទៅឱ្យ Invitrogen ហើយ Invitrogen បានផ្សព្វផ្សាយវិធីសាស្ត្រនេះទៅកាន់ពិភពលោក ហើយបានក្លាយជាវិធីសាស្ត្រដែលគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយ។

ក្រោយមក Invitrogen ត្រូវបានទិញដោយ Thermo!

ផលិតផលតំណាង៖ សារធាតុប្រតិកម្ម TRIzol របស់ Invitrogen

ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ វិធីសាស្ត្រទឹកភ្លៀង TRIzol តម្រូវឱ្យមានទឹកភ្លៀង និងការទាញយក RNA ច្រើន ហើយសារធាតុដែលប្រើមានជាតិពុល និងចំណាយពេលយូរដើម្បីដំណើរការ។

ដូច្នេះ វិធីសាស្ត្របន្សុតអង់ស៊ីមជួរឈរជំនាន់ទី 2 បានចូលជាធរមាន ដោយប្រើភ្នាសស៊ីលីកាជែល ជាសម្ភារៈស្រូបយកអាស៊ីត nucleic ជាក់លាក់ ដើម្បីបង្កើនការស្ទុះងើបឡើងវិញនៃ RNA ក្នុងសំណាកគំរូ ខណៈពេលដែលយកចេញនូវភាពមិនបរិសុទ្ធផ្សេងទៀត។

វិធីសាស្រ្តជំនាន់ទី 2 ជួយសម្រួលដល់ប្រតិបត្តិការលើមូលដ្ឋាននៃការអនុវត្តប្រកបដោយស្ថេរភាព កាត់បន្ថយកត្តាហានិភ័យ និងបង្កើនប្រសិទ្ធភាពនៃការទាញយក RNA ។

ផលិតផលតំណាង៖ QIAGEN RNeasy និងផលិតផលក្នុងស្រុកភាគច្រើន

ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ទាំងវិធីសាស្រ្តជំនាន់ទី 1 និងទី 2 តម្រូវឱ្យប្រើប្រាស់ DNase ដើម្បីលុបការចម្លងរោគ DNA ដែលនាំមកនូវភាពរអាក់រអួលខ្លះដល់ការពិសោធន៍ខាងក្រោមជាបន្តបន្ទាប់។DNase សំណល់នឹងកាត់បន្ថយប្រសិទ្ធភាពនៃការចម្លងបញ្ច្រាស និងកាត់បន្ថយការសំយោគ cDNA ខ្សែទីមួយ ដោយហេតុនេះប៉ះពាល់ដល់ភាពត្រឹមត្រូវនៃលទ្ធផល។

ដូច្នេះ​វិធីសាស្ត្រ​ចម្រាញ់​ចេញ​ជំនាន់​ទី​បី​ត្រូវ​បាន​ធ្វើ​ឱ្យ​ប្រសើរ​ឡើង​តាម​មូលដ្ឋាន​នៃ​ជំនាន់​ទី​ពីរ។ការពិសោធន៍មិនចាំបាច់បន្ថែមអង់ស៊ីមណាមួយឡើយ ហើយ RNA អាចទទួលបានយ៉ាងងាយស្រួលដោយមានតែពីរជួរប៉ុណ្ណោះ។

ជួរទី 1៖ ជួរឈរសម្អាត DNA ដើម្បីសម្អាត DNA

ជួរទី 2៖ ជួរឈរតែ RNA ពិសេសស្រូបយក និងស្ដារ RNA

ប្រតិបត្តិការដ៏សាមញ្ញបែបនេះមិនត្រឹមតែជួយសន្សំសំចៃពេលវេលាប៉ុណ្ណោះទេ ថែមទាំងជួយសម្រួលដល់ប្រតិបត្តិការនៃការពិសោធន៍ចុះក្រោម!

ផលិតផលតំណាង៖ QIAGEN RNeasy Plus និងបុព្វបុរសផលិតផលស៊េរី RNA បន្សុត

(RNeasy Plus)

(របស់ ForegenePlant Total RNA Isolation Kit)

ប្រាប់ស្ងាត់ៗ!កញ្ចប់ RNA របស់ Foregene ក៏បង្ហាញនូវ RNase Eraser ដ៏ងាយស្រួលប្រើផងដែរ ដែលអាចកម្ចាត់ RNase 400μg លើផ្ទៃរឹងបានទាំងស្រុងក្នុងរយៈពេល 1 នាទី ដោយមិនបន្ថែមសារធាតុពុលដល់រាងកាយមនុស្ស!

រូប១៖ តារាងប្រៀបធៀបដំណើរការប្រតិបត្តិការ

ផលិតផលរបស់ Foregene អាចបញ្ចប់ការទាញយក RNA ត្រឹមតែពីរបទប៉ុណ្ណោះ កុំធ្វើឱ្យអ្នកដទៃច្រណែននឹងការពិសោធន៍របស់អ្នករីកចម្រើន!

រូប២៖Eលទ្ធផលពិសោធន៍ តារាងប្រៀបធៀប

ជំនាន់ទីមួយ (1: TRIzol)

ជំនាន់ទីពីរ (2: RNeasy of QIAGEN)

ជំនាន់ទីបី (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

រូប3: ក្រាហ្វ qPCR (ក្រាហ្វខ្សែកោងពង្រីក)

ជំនាន់ទីមួយ (ពណ៌បៃតងមានន័យថា TRIzol - ពណ៌ក្រហមមានន័យថា TRIzol +)

ជំនាន់ទីពីរ (មេឃពណ៌ខៀវមានន័យថា QIAGEN RNeasy-, ពណ៌ក្រហមមានន័យថា QIAGEN RNeasy +)

ជំនាន់ទីបី (ពណ៌ខៀវមានន័យថា QIAGEN RNeasy plus ពណ៌បៃតងមានន័យថា Foregene)

(ចំណាំ៖ ក្រាហ្វ qPCR “-” បង្ហាញថា DNase មិនត្រូវបានបន្ថែម ហើយការចម្លងរោគ DNA មិនត្រូវបានដកចេញទេ។ ដូច្នេះ CT គឺខ្ពស់ជាង ហើយលទ្ធផលគឺមិនត្រឹមត្រូវទេ “+” បង្ហាញថា DNase ត្រូវបានបន្ថែម ហើយការចម្លងរោគ DNA ត្រូវបានដកចេញ លទ្ធផលគឺត្រឹមត្រូវ)

រាល់ការអាប់ដេតបច្ចេកទេសមានន័យថាប្រតិបត្តិការនៃការពិសោធន៍កំពុងអភិវឌ្ឍក្នុងទិសដៅសាមញ្ញ និងងាយស្រួលប្រើជាងមុន។

Foregene មានគោលបំណងជួយអ្នកស្រាវជ្រាវវិទ្យាសាស្ត្របន្ថែមទៀត សន្សំពេលវេលា និងការចំណាយលើការពិសោធន៍ ទទួលបានលទ្ធផលពិសោធន៍ដែលមានគុណភាពខ្ពស់ និងរួមគ្នាបង្កើតសមិទ្ធិផលស្រាវជ្រាវវិទ្យាសាស្ត្រដ៏មានតម្លៃបន្ថែមទៀត។